Una vez pasado el tiempo de cultivo para la obtención de los cromosomas metafasicos (Práctica 3), se procede a parar el cultivo. Para ello se añade un agente que detiene que detiene la división celular en estado de metafase (Colcemid, que deshace los filamentos del huso acromático impidiendo que la mitosis llegue a anafase, donde se descondensan los cromosomas). Seguidamente, el tratamiento con una disolución hipotónica, choque hipotónico, que provoca el hinchamiento y rotura de membranas celulares.
Lo siguiente, para evitar su dispersión, es aplicar una solución de Carnoy (3:1, 3 partes de metanol y 1 de ácido acético glacial)
Por último, realizar extensión de cromosomas en un portaobjetos y tinción