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TÉCNICAS HISTOLÓGICAS (TINCIÓN (Los colorantes se combinan creando cambios…
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
TINCIÓN
Los colorantes se combinan creando cambios relativos de densidad óptica y color. La mayoría de los colorantes utilizados no son por completo ácidos o bases, sino sales neutras hidrosolubles que se disocian y liberan en aniones y cationes.
Los diferentes componentes de los tejidos poseen en su mayoría los mismos índices de refracción, por lo que su diferenciación óptica es difícil; por ello es más fácil interpretar imágenes obtenidas de preparaciones teñidas.
Como ya se mencionó previamente, los principales colorantes utilizados son la eosiona (más ácido) y la hematoxilina (con propiedades básicas).
AUTORRADIOGRAFÍA
Método útil para localizar y analizar una secuencia temporal específica de ciertos fenómenos de síntesis y metabolismo de moléculas dentro de las células.
Requiere la incorporación de isótopos radioactivos como marcadores.
Se basa en la ionización de la energía producida por los isótopos sobre los granos de plata en una emulsión fotográfica.
HISTOQUÍMICA
Método que permite localiza, mediante reacciones, moléculas y componentes específicos en células y tejidos "in situ", formando un precipitado insoluble, coloreado o electrodenso.
Se divide en
Histoquímica enzimática
Se utiliza para identificar enzimas en células y tejidos, específicamente, el producto de reacción de la actividad enzimática.
Inmunohistoquímica
Permite identificar constituyentes tisulares de tejidos (antígenos) por medio de interacciones antígeno-anticuerpo. Requieren el desarrollo previo de un anticuerpo contra la molécula a localizar y marcar el anticuerpo con una sustancia fluorescente, que al precipitarse al sitio de reacción antígeno-anticuerpo suministra una coloración observable con el microscopio óptico.
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Inmunocitoquímica
La localización de la marca se lleva a cabo mediante microscopía electrónica , en cambio la que describe la localización que no reconoce la microscopía óptica se conoce como inmunohistoquímica. Los principios en estos mecanismos son los mismos, las diferencias entre estos métodos son la marca que debe ser electrodensada y el tejido que debe embeberse en resina epóxica hidrofílica para obtener cortes delgados.
TÉCNICAS DE HIBRIDACIÓN
Es un método de localización de ARNm (ARN mensajero) o ADN mediante la hibridación de la secuencia de interés con una sonda de nucleótidos de secuencia complementaria.
El término "hibridación" describe la capacidad de
las moléculas monocatenarias de ARN o ADN para interactuar (hibridar) con secuencias complementarias.
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Permiten elaborar preparaciones de células y tejidos para analizarlos por medio de diferentes microscopios.
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