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Análise do DNA (Reação em cadeia da polimerase (PCR) (Amplificação de…
Análise do DNA
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Clonagem molecular
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2.Tratamento do DNA com enzimas de restrição (endonucleases) para obtenção de fragmentos específicos.
- Observação dos fragmentos através da eletroforese em gel.
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PCR em tempo real (qPCR)
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Quantificar o número de cópias de uma sequência de DNA ou avaliar uma expressão por meio de um PCR com transcriptase reversa.
Etapas da PCR
- Desnaturação térmica do DNA-molde (94 graus).
- Hibridização ou anelamento (55 graus).
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ELETROFORESE
Separação de partículas dissolvidas ou suspensas em um eletrólito através de uma corrente elétrica aplicada.
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Eletroforese em gel
Tamanho do DNA, concentração do gel, intensidade da corrente, tipo de tampão (velocidade da partícula).
Agarose: gel poroso, polissacarídeo composto de ágar e pectina.
Poliacrilamida: polímero com capacidade de separar fragmentos muito pequenos de DNA. Também separa proteínas.
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As técnicas moleculares são utilizadas para isolar, recombinar e amplificar os genes.