1.3 El laboratorio de citogenética y cultivos celulares
El equipamiento
Equipamiento especifico para cultivos celulares
Cabina de flujo laminar es la infraestructura en el interior de la cual se realizan todos los procesos y manipulaciones de cultivos celulares; preparación de medios, siembra de los cultivos, cambios de medio, subcultivos, etc.
Incubador de CO2 es el aparato que proporciona las condiciones ambientales optimas para el crecimiento de las células en el medio de cultivo.
Microscopio invertido se caracteriza por tener invertidas la posición de la fuente de luz y el revolver de objetivos respecto a un microscopio convencional.
Equipo de criogenia permite conservar a largo plazo y en forma viable muestras de células y lineas celulares.
Equipamiento especifico para citogenética
Equipo de análisis de imagen. Es básico para documentar y analizar metafases, con el fin de obtener un cariotipo.
microscopio óptico convencional y de fluorescencia. Se utiliza para recuentos de células, estudios de viabilidad y morfología celular, visualización de preparaciones de hibridacion in situ fluorescentes, etc.
Cámara digital
Software especifico
Equipamiento común
Sistema de purificación de agua
Nevera y congeladores de -20ºC y -80ºC
Equipo de esterilización. La esterilidad de todo el material y de los reactivos que estén en contacto con los cultivos es imprescindible.
Otros equipamientos
Autoclave para esterilizar todo tipo de material.
Sistema de filtración con filtros de 0,22 um para esterilizar soluciones.
La estructura del laboratorio
Sala de cultivos. Sala limpia en la que se van a realizar todos los procedimientos directamente relacionados con el cultivo celular.
Sala de laboratorio convencional. Sala sucia en la que se van a realizar todos l os procedimientos que no están directamente relacionado con el cultivo celular.
Sala de frio. Congeladores y el equipo de criogenia. Esta sala debe estar separada de la sala de cultivo ya que los congeladores generan bastantes turbulencias.
Las condiciones de trabajo: técnica estiptica Normas mas importantes
No sacar el material estéril de su embalaje hasta el momento de su uso.
El material usado reutilizable de vidrio se puede colocar en un recipiente con hipoclorito al 10% hasta finalizar la sesión de trabajo.
Colocara en el interior de la cabina el material que se vaya a utilizar.
El material fungible utilizado en la cabina se deposita en contenedores apropiados para material contaminado.
No introducir mecheros en las cabinas.
Restringir el acceso a la sala de cultivo exclusivamente al personal que este realizando algún procedimiento.
Uso exclusivo de material y reactivos estériles.
La puerta de la sala siempre cerrada.
En las cabinas dotadas de lampara germicida UV, esta se puede conectar después de la limpieza un max. de 30 min.
Uso de guantes y batas desechables estériles.
Realizar un mantenimiento programado de las cabinas.
Lavado frecuentes de manos.
Limpieza y desinfección de superficies con etanol al 70% o desinfectantes apropiados.
Microscopio óptico convencional. De luz transmitida, para visualizar las metafases teñidas con técnicas de bandeo.
Control de humedad
Control de CO2
Recirculación del aire
Control de temperatura
Segundo filtro HEPA
Filtro HEPA de gran superficie
Sistema mecánico
Rejilla frontal
Panel frontal transparente
El laboratorio de cultivos celulares tiene como objetivo la propagación o crecimiento de células eucariotas de organismos pluricelulares en medios de cultivo artificiales en condiciones controladas.
El laboratorio de citogenética tiene como objetivo el estudio de los cromosomas de especies eucariotas.