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0306 LSTM筆記, 組織透明化 (大型完整的生物系統 結構和功能 (光學領域獲得資訊 (看這些生物系統需要非常大量的 快速高解析度…
0306 LSTM筆記
組織透明化
大型完整的生物系統
結構和功能
光學領域獲得資訊
看這些生物系統需要非常大量的
快速高解析度 "3D成像"
點掃描方式:
confocal / two photon 顯微術
優點:
高成像品質
缺點:
速度慢
光漂白率高
造成:
低軸向解析度
成像深度
限制:
對大型組織透明化樣品的高解析度
成像的效果
使得不適合對於大體積的效果成像
confocal 的變種
可以提升成像速度
光片顯微術
正交單平面照明
最小的光漂白
同時全平面檢測
高成像速度
然而,正交照明檢測幾何結構的這些優點
也需要兩側不受阻礙的樣品
限制了成像體積的橫向尺寸
LSM 替代光學配置
iSPIM(倒置顯微鏡)
limit on imaging depth and quality??????
儘管以顯著降低檢測物鏡的可用工作距離為代價,iSPIM / diSPIM方法確實減輕了成像體積橫向尺寸的限制; 因此,它仍然局限於用於大樣本成像的相對低數值孔徑(NA)/長工作距離(WD)檢測目標。????????????????????? => 只能用低NA / 高WD
diSPIM
OCPI:
相對於樣品表面將照明 和 檢測軸旋轉
45度
SCAPE / OPM
利用旋轉的光學元件,產生 "傾斜光片"
照射的傾斜平面成像
總之,LSM成像的 "挑戰"
體積的放大
同時"高成像品質", "速度"
化學混合物