Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Lääkeaineen pitoisuuden määrittäminen tablettinäytteestä HPLC-UV …
Lääkeaineen pitoisuuden määrittäminen tablettinäytteestä HPLC-UV -menetelmällä
Menetelmän perusteet
käänteisfaasikromatografia: analyytti retentoituu poolittomaan stationaarifaasiin
poolittomat aineet pysyvät poolittomassa eluentissa ja kulkeutuvat kolonnin läpi detektorille nopeammin
UV-detektori toimii kuten UV-vis -spektrofotometri: se mittaa näytteestä läpi kulkeneen ja näytteeseen kohdistetun säteilyn intensiteetin suhteen
Koeasetelma
jauhettu tabletti liuotetaan etanoliin
näyte laimennetaan ja ruiskusuodatetaan
HPLC-UV-ajo näytteelle ja standardinäytteille, joissa tunnetut pitoisuudet tutkittavan aineen puhdasainetta
kromatogrammeista tunnistetaan analyytin piikit, joiden pinta-alat ovat verrannolliset analyytin absorbanssiin
standardinäytteiden pitoisuuksista ja piikkien pinta-aloista saadun kalibraatiosuoran yhtälön avulla laskettua pitoisuus näytteelle
Merkitys laadunvarmistusanalytiikassa
pitoisuusmääritys
lääkkeen teho ja turvallisuus
aineiden tunnistus retentioaikojen perusteella
metaboliittien ja epäpuhtauksien identifiointi/kvantitointi
Virhelähteet
kaikki lääkeaine ei liukene etanoliin
eluentista ei ole poistettu ilmaa
taustakohinaa detektorilla
kromatogrammi vaikeammin tulkittavissa
riittämätön resoluutio kromatografisessa analyysissä
eri aineiden aiheuttamat piikit eivät erotu kromatogrammissa riittävän hyvin
näytteen suodatus tehty huonosti
kolonni voi tukkeutua suurista partikkeleista
eluentin virtaus lakkaa tai häiriintyy, retentioajat eivät enää luotettavia, kun eluentin virtausnopeus ei pysy vakiona
tablettia ei jauhettu riittävän hienojakoiseksi
kaikki lääkeaine ei liukene liian suuren partikkelikoon takia
käytetty detektioaallonpituus ei vastaa analyytin absorptiomaksimiaallonpituutta
kromatogrammin piikki voi jäädä liian pieneksi kvantitatiivista määritystä varten
lämpötila muuttuu analyysin aikana
injektorin tai eluenttipumpun toiminta häiriintyy
tabletin apuaineita liuennut näytteeseen selektiivisestä kiinteä-nesteuutosta huolimatta
voivat vaikuttaa kromatogrammin tulkittavuuteen
epäpuhtaudet jossakin kromatografialaitteiston osassa
näytettä jäänyt käytettyihin astioihin
vääristää tulosta
standardinäytteiden pitoisuudet laskettu väärin
kalibraatiosuora virheellinen
tulos virheellinen
kromatogrammi tulkittu väärin
väärien piikkien pinta-alat ja retentioajat