Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
3.1 Lääkeaineen pitoisuuden määrittäminen tablettinäytteestä HPLC-UV …
3.1 Lääkeaineen pitoisuuden määrittäminen tablettinäytteestä HPLC-UV -menetelmällä.
Merkitys lääkeanalytiikassa
Metaboliittien erotteleminen ja tunnistaminen
Lähisukuisten yhdisteiden tutkiminen
Peptidien tutkiminen
Puhtauskokeet
Epäorgaanisten ja orgaanisten yhdisteiden tutkiminen
Lääkeaineiden pitoisuuden määrittäminen
Lääkeaineen erottaminen
Apuaineista
Epäpuhtauksista
Hajoamistuotteista
Toisista yhdisteista
Stabiilisuuskokeet
Keskeinen kvantatiivisessa lääketutkimuksessa
Lääkeaineen logP ja pKa-arvojen määritys
HPLC-UV -menetelmän perusteet
Stationäärifaasi on C18( pooliton), liikkuva faasi on fosforihappo, asetonitriili (poolinen)
Pooliset yhdisteet eluoituvat nopeammin
Pumput pumppaavat liikkuva faasia kolonnin läpi detektorille
Käänteisfaasikromatografia
Detektori mittaa aiheuttamaa absorbanssia
Erottuminen perustuu eroihin hydrofobisuudessa
Näytteen komponenttien erottelu tapahtuu kolonnissa
Datan kuvaaja- kromatogrammi
Retentioaika on kullekin yhdisteelle spesifinen tunnusluku
Piikin koko on suoraan verrannollinen konsentraatioon
Lääkeaineen tunnistaminen
Tuntemattoman näytteen pitoisuus saadaan standardisuorasta
Verrataan referenssinäytteeseen
Isokraattinen eluutio( eluenttikoostumut vakio analyysin aikana)
Tarkka, toistettava, vakaa
Virhelähteet
Näytteen hävikki
Lääkeaineen osa on jäänyt punnistusastiaan, koeputkeen
Heitto konsentraatioarvoon
Eluentin virtausnopeuden muutos
Retentioajat muttuvat
Vaaka ei kalibroitu
Väärä tulos
Eluentista ei ole poistettu ilmaa
Ilmakuplat häiritsevät pumppujen ja detektorin toimintaa
Eluentti ei liikku sopivalla tavalla
Retentioajat muuttuvat
pH-muutos
Vaikutus retentioaikaan
Laskuvirheet
Väärät kaavat
Väärät arvot
Supistusvirheet
Näppäilyvirheet
Laimennos on jäänyt huomiomatta
Ongelmia Excel-ohjelman kanssa
Väärä kalibraatiosuora
Näytteitä ja eluenttia ei suodatettu
Epäpuhtauksia analyysiin
Kiinteät partikkelit
Laitteisto häirintyy
Ei kovin tehokas kolonni
Huono resoluutio
Standardiliuosten väärät konsentraatiot
Väärä standardisuora
Väärät näytteiden pitoisuudet
Väärä pipetointitekniikka
Väärät näytteiden konsentraatiot
Väärä tulos
Näytteen pitoisuusmäärityksen koeasetelma
Standardinäytteiden valmistus
10 mg/ml kantaliuos etanoliin
Laimennokset ( pitoisuudet ovat 100-500 µg/ml)
Ruiskusuodatus
Kromatogrammissa signaali samalla retentioajalla
Piikin koko kasvaa standardinäytteen pitoisuuden kasvaessa
Kukin signalin pinta-ala määritetään ja laaditaan standarisuora
x-akselilla pitoisuus, y-akselilla piikin pinta-ala
Näyteliuosten valmistus
Itse valmistettu 0,1 % ASA
Laimennos 1/3
Analyysoidaan kromatografisesti
0,1% ASA, joka tehty 21.1.2019
Laimennos 1/3
Asetyylisalisyylihappotablettinäyte
0,047848g ASA + etanoli
Ruiskusuodatus mittapulloon
ASAn piikit integroidaan ja saadaan pinta-alat
Kalibraatiosuoran avulla ja näytteiden pinta-alojen avulla saadaan pitoisuudet mg/ml , sen jälkeen %
Rasitusolosuhteissa säilytetty ASA
Laimennos 1/3
Esikäsittelyn perusteet
Endogeeniset yhdisteet häiritsevät lääkeaineiden rakenteiden ja pitoisuuksien määrittämistä
Endogeeniset yhdisteet likaavat analyysilaitteistoja
Tarkoitus:Näytteen puhdistus
Suodatus: pois kiinteistä partikkeleista