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Proteintransport zw ER und Cytosol (ER-Tail-Anchored-Proteins (durch C…
Proteintransport zw ER und Cytosol
ER-Signal-Sequenz
ER-Retention-Sequenz
für ER-Residents
4 AS am C-Terminus
ER-SS = Start-Transfer-Sequenz
hydrophobe Alpha-Helix
kann in Membran inserieren
bindet an Translokator und öffnet Gate --> initiiert so die Translokation
Stop-Transfer-Sequenz
ebenfalls hydrophobe Alpha-Helix
für TM-Proteine relevant
SS nach Start-T-S
Translokator
in ER-Membran
Sec 61
Struktur
2 UE (dawz Seam)
Seam
Open-Seam-Konformation
laterale Öffnung in Membran
a) Freisetzung SS nach Schneiden (meist Degradation in Membran)
b) Insertion TM-Proteine
Plug (geöffnet durch SS)
hydrophile Pore
Signal-Recognition-Particle (SRP)
Ribonucleoprotein
6 Protein-UE + 1 RNA
1 Domäne, um Translation zu pausieren = Ribosom-BS
1 Domäne, um SS zu binden
1 Domäne um SRP-Rezeptor zu binden (wird frei durch Konfo-Änderung, dich durch Binden der SS ausgelöst wird)
SRP-Rezeptor (in ER-Membran)
Mechanismus:
a) SRP bindet SS und Ribosom
b) zu ER und bindet SRP-Rezeptor
c) Rezeptor bringt Komplex zu Translokaor
d) SS bindet an Translokator
e) Translokation beginnt; SRP+Rezeptor dissoziieren
ER-Tail-Anchored-Proteins
durch C-term. hydrophobe Alpha-Helix in ER-Membran
Bsp. SNARE
Insertion post-translational
über ATPase + MP-Insertions-Maschinerie
Single Pass TM-Proteine
Möglichkeit 1:
a) N-terminale Start-TS
b) danach Stop-TS --> Translokation stoppt
c) Start-TS wird geschnitten (lateral in Membran)
d) Protein lateral entlassen; verankert über Stop-TS
Möglichkeit 2:
a) interne Start-TS
b) nicht geschnitten; Protein lateral entlassen; verankert mit Start-TS
2a) mehr + / SS / weniger + --> C-Terminus im Lumen
2b) weniger + / SS / mehr + --> N im Lumen
weil: im ER mehr -
Mulit-Pass TM-Proteine
Double-Pass
a) interne Start-TS
b) interne Stop-TS danach --> Stop&Freilassung
c) laterale Öffnung & Entlassung
Multi-Pass
Alternation von Start und Stop
bei jeder Start: Reinitiation
bei jeder Stop: Stop und Freilassung
Translokation
co-translational am Ribosom (keine Energie notwendig)
post-translational (Energie durch ATPase)
lösliche Proteine vollständig in Lumen transloziert