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Protein-Analyse (Protein-Analyse (Massenspektrometrie (unbekannte Proteine…

- - - - H: hat nuklearen Spin
      - in magnet. Feld --> alignt sich parallel (lower energy state) oder antiparallel (higher)
      - Bestrahlung mit Radiowellen --> Energie: von para in anti (=Resonanz)
      - weniger E nötig, wenn H von dichter e- Wolke umgeben ist --> ist also abh. von e- Dichte der Umgebung also von Bindungspartnern
  - - - fluoreszierende Tags
      - --> Menge Komplex am GGW gemessen
      - bzw. --> Geschw.-Konstante
    - - Fluorophor mit linear pol. Licht angeregt
      - wenn keine Rotation: emittiertes Licht lin. pol. --> hohe FP
      - wenn Rotation: depol. Licht --> geringe FP
- - - - vermischen
      - Heterokaryon (selektives Medium)
      - Meiose --> Hybrid
      - Klone kultivieren
- - - - --> Immunpräzipitation
      - --> Affinitäs-C.
      - durch AK spezif. erkannt
    - - 2 Tags, getrennt durch Cleavage Site
      - 2 Affinitäts-C.
- - - - I) unfold from Native State
      - --> Form ist bei allen gleich
      - --> Freisetzung von evt. Bindungspartnern
      - so: Auftrennung nur nach Größe (MW) nicht nach Form oder Ladung
      - II) alle binden gleiche Menge SDS --> alle gleiche - Ladung (Eigenladung wird überdeckt)
    - - Reduktionsmittel
      - bricht DSB
    - - Isoelectric Focusing
        
        pH-Gradient
        
        Protein wandert bis zu iP
      - SDS-PAGE