Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
3.1 Lääkeaineen pitoisuuden määrittäminen tablettinäytteestä HPLC-UV …
3.1 Lääkeaineen pitoisuuden määrittäminen tablettinäytteestä HPLC-UV -menetelmällä
Virhelähteet
HPLC-UV -menetelmä
kalibrointia ei tehty
eluenttikoostumus on kärsinyt
kolonni on vanha
likaiset työvälineet ja huolimaton työskentely
suodatus epäonnistunut
suodatin lähtenyt ruiskusta irti, jolloin suodattamatonta ainetta päässyt joukkoon
suodatus unohtunut kokonaan
rikkinäinen suodatin
suodatettu väärässä järjestyksessä
ASA tabletti vaurioitunut ennen näytteen tekoa
liuokset hydrolysoituneet liikaa säilytyksen aikana
Standardiliuokset epäonnistuneet
laimennettu väärillä suhteilla
pipetoitu vahvimmasta laimeimpaan
pipetin käyttö
pipettiin jäänyt ilmaa
laimennokset tehty väärin
yksikkömuunnos virheet
laskuvirheet
virheellinen standardisuora
laimennukset unohdettu ottaa huomioon
väärin lasketut piikkien pinta-alat
unohdettu kirjoittaa ylös tarkka ASA:n punnittu paino
unohdettu merkata, mikä näyte on missäkin kohdassa HPCL-laitteistossa
Merkitys lääkeanalytiikassa
pystytään tutkimaan säilytysolosuhteita
stabiilisuustutkimukset
lääkeaineiden metaboliittien analysointi
Jakautumiskertoimen ja pKa:n määrityksen apuna
Menetelmän perusteet
Esikäsittely
Kiinteänesteuutto
tavoitteena on erottaa lääkeaine muista kiinteistä aineista
tavoitellaan lääkeaineen liukenemista nestefaasiin
uuttoliuos kerätään talteen suodattamalla kiinteä faasi pois
HPLC-UV
Liikkuva faasi eli eluentti virtaa jatkuvasti kolonnin läpi ja kuljettaa
analyyttimolekyylejä eteenpäin
Analyyttimolekyylit vuorovaikuttavat stationäärifaasin kanssa matkallaan
kolonnin läpi
UV-spektrofotometri mittaa detektori näytevyöhykkeiden aiheuttamaa absorbanssia
Mitä enemmän vuorovaikutuksia stationäärifaasin kanssa, sitä hitaammin
analyyttivyöhyke kulkee kolonnin läpi
Mitä suuremmat erot erilaisten analyyttimolekyylien vuorovaikutuksessa
stationäärifaasin kanssa, sitä paremmin eri analyytit saadaan erottumaan
toisistaan
Koeasetelma
tehdään laimennos itse valmistetusta "tuoreesta" ASA:sta
tehdään laimennokset valmiina olevasta ASA:sta
kiinteää ASA:a säilytetty 6kk ajan 37 asteessa 75% kosteudessa
tehdään laimennos rasitusolosuhteissa olleesta ASA:sta
37 asteessa 75% kosteudessa
Suodatetaan näytteet ruiskusuodattimella, jotta HPCL-laitteisto ei tukkiudu
Tunnistetaan ASA:n tuottama piikki
näytteiden pitoisuudet lasketaan ASA:n piikkien pinta-alojen ja kalibraatiosuoran yhtälön avulla
Päätellään: ASA ei hajoa juurikaan kiinteänä, ASA rupeaa helposti hajoamaan emäksisissä oloissa
Standardinäytteiden avulla piirretään kalibraatiosuora, josta saadaan yhtälö
tehdään laimennos murskatusta ASA tabletista
kaikki ei liukene, koska osa apuaineista ei liukene
standardinäytteet