É o fundamental para se proceder ao adequado tratamento, sendo efetuado, preferentemente, a partir de uma biopsia excisional. O pedido de biopsia deverá conter dados suficientes para ajudar o patologista, tais como: nome, sexo, idade, cor, local de onde foi retirada a lesão, profissão, possíveis antecedentes pessoais e/ou familiares relevantes.
O laudo do exame histopatológico deverá ser completo, relatando, ao menos: subtipo histológico, espessura de Breslow, nível de Clark, presença ou não de ulceração, presença ou não de regressão, índice mitótico, grau de infiltração linfomononuclear, dimensão das margens de ressecção.
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