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Práctica 6. Precipitación - Coggle Diagram
Práctica 6. Precipitación
Al mezclar una solución de antígenos no particulados (es decir moléculas) con
sus anticuerpos correspondientes se producirá la unión antígeno anticuerpo.
Si la proporción de estos dos elementos es equivalente se formarán complejos inmunes
insolubles que resultarán en un proceso de precipitación observable a simple vista.
Para que se produzca la inmunoprecipitación es necesario que exista una proporción óptima de antígeno, así como de anticuerpos (zona de equivalencia),
Por lo tanto, existen diferentes fases en la formación de la zona de equivalencia, conocidas como prezona y postzona
Lo anterior dependen de las concentraciones de antígeno y anticuerpos contenido en la muestra
Pruebas de precipitación fase líquida
Es necesario titular la cantidad de antígeno para lograr que
se forme la zona de equivalencia
Pruebas de precipitación en medios semisólidos
No se requiere titular previamente el antígeno o suero, la proporción adecuada de estos elementos se producirá al difundirse ambos en el agar.
Usos
Diagnóstico de enfermedades infecciosas
Gumboro
Anemia infecciosa equina (prueba de Coggins)
Influenza aviar
Tricomoniasis
Piroplasmosis
Brucelosis ovina (B. ovis)
Identificación de
carnes y embutidos (adulteración)
Técnicas de precipitación
Pruebas serológicas de fijación secundaria, que poseen un rango de sensibilidad que oscila entre los 3 – 15 μg de anticuerpos por cada mililitro de suero
Pueden realizarse en medios líquidos y semisólidos
Medios líquidos
Prueba de Ascoli
Se añaden sin mezclar cantidades iguales de antígeno y antisuero en un pequeño tubo de ensayo
Al cabo de
una hora de incubación a 37°C se lleva a cabo la lectura
Un resultado positivo
sería la formación de un precipitado visible al fondo del tubo
Prueba de Lancefield
Se realiza en tubo capilar y es muy útil cuando la muestra es escasa
ya que para hacerla se requieren pequeñas cantidades de antígeno y antisuero
Medios semisólidos
Prueba de Oudin (difusión simple)
El antisuero con el agar fundido, la mezcla se distribuye en tubos
de ensayo y se deja solidificar
Sobre el agar se deposita el antígeno incubando a
37°C o a temperatura ambiente de 4 a 5 días
Al difundirse e antígeno en la mezcla agar – antisuero si el resultado es positivo se formarán líneas de precipitación. Si el antígeno es una sustancia pura solamente se formará una línea de precipitación
Prueba de Ouchterlony (difusión doble)
Se hace en cajas de Petri, en una placa de vidrio o en un portaobjetos.
En el agar ya solidificado con un sacabocados se hacen pozos en los que se colocan
el antígeno y los antisueros
Radialmente se difunden a través del agar y sí corresponden, se formarán líneas del precipitado
El número de estas líneas corresponderá a los diferentes complejos antígeno-anticuerpo existentes
Prueba de Mancini
Se coloca una capa de la mezcla agar – antisuero específico sobre una laminilla de
vidrio o caja de Petri en la que se hacen unos pozos donde se añadirá el antígeno
Esta prueba se utiliza para hacer determinaciones cuantitativas de antígenos
El agar contiene anticuerpos específicos para el antígeno D
Rodríguez Saucedo Angélica 1506