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VECTORES DE CLONACION, Jorge Alejandro Tejeda Romero Biología Molecular 11…

- - - - Los bancos de ADNc se construyen a partir de secuencias de ARNm mediante una reacción in vitro que sintetiza una primera cadena de ADNc utilizando una ADN polimerasa con actividad de transcripción inversa
    - - Para construir bancos de ADN es necesario aislar el ADNg del organismo de interés. Este ADNg se corta con enzimas de restricción para generar fragmentos con extremos complementarios a los del vector de clonación
- - - - Se replican de forma autónoma, portan información genética y pueden conferirle a la bacteria nuevas propiedades o desarrollarse procesos patológicos
        
        Infección con fagos. Después del empaquetamiento in vitro del factor recombinante en partículas del fago
        
        Tamaño del inserto que se puede clonar (23 000 pb)
  - - - Contienen los genes de selección y un sitio ORI del plásmido, por lo que se replican de manera independiente del genoma bacteriano, como lo hacen los plásmidos
        
        Dependiendo del tamaño del inserto de ADN se puede utilizar cualquiera de los métodos anteriores. Fragmentos largos necesitan empaquetamiento en fagos I
        
        Tamaño del inserto que se puede clonar (45 000 pb)
  - - - Funcionan como medio de trasporte de genes a otras bacterias como la resistencia a antibióticos
        
        Transformación química o por electroporacion. Las células se vuelven competentes para incorporar el plasmático recombinante
        
        Tamaño del inserto que se puede clonar (15 000 pb)
  - - - Este tipo de vectores son particularmente útiles para estudios de mapeo de cromosomas, por su capacidad para almacenar fragmentos de gran tamaño