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Electroforesis, después de vaciar la agarosa a la cámara,
debe insertarse…
Electroforesis
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Horizontal
Gel de agarosa, se usa para A. Nucleicos, el buffer de corrimiento debe cubrir el gel, se puede cargar la muestra en seco y se corre a un voltaje bajo, hasta que la muestra entre en gel.
Vertical
Gel de poliacrilamida, es para proteínas o Á. nucleicos de pequeño tamaño. El gel esta contenido entre dos placas, donde la corriente eléctrica se genera gracias al buffer
Elementos necesarios:
Cámara de electroforesis
Gel
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Gel semisólido compuesto de polímeros que forman microporos a traves de las cuales pasan las moléculas separándolas según el peso Molecular
Agarosa
Agarosa extraída de algas marina, solida a temperatura ambiente y se disuelve a 50-60°C
Acrilamida
Es un polímero sintético, termoestable, incoloro y químicamente inerte, se pueden generar geles con varios tamaños de poro.
Genera un campo eléctrico alrededor de un gel donde se depositan las muestras. Cuenta con dos polos que se conectan a una fuente de energía
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después de vaciar la agarosa a la cámara,
debe insertarse el o los peines
Una vez solidificado el gel,
se añade el buffer de corrimiento (TAE o TBE) cubriendo el gel y se retiran los peines
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