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基因编辑 - Coggle Diagram
基因编辑
传递方式
AAV
剂量和给药途径
持久的转基因表达
可逆的瞬时表达
光照诱导
药物诱导组装或分裂构建重构
药物诱导启动子进行瞬时表达
药物诱导的不稳定结构域失活蛋
利用传递的CRISPR机制裂解DNA
包装大小
双载体+split inteins:是否双载体可以通过某种方式共同进入同一个细胞?
电穿孔
材料
慢病毒
修复方式
NHEJ
NHEJ普遍存在于人类细胞中,将两个断裂的DNA末端连接在断裂位点上。这一靶向切割和修复过程可以反复进行,直到出现插入或缺失(indel),阻止核酸酶进一步识别靶点。
HITI
HDR
主要发生在细胞S期和G2期,需要模板和同源臂。
不同的Cas9
靶向RNA
Cas13d(包含CasRX)
Cas13a(AAV载体)
靶向DNA
Cas12a
Cas9
SpCas9:需模板及双链断裂,4.2kb
SpCas9
Sacas9:需模板及双链断裂,3.2kb
Base editing:无模板,无双链断裂,无HDR,5.6kb/5.3kb
Prime Editing:无模板,无双链断裂,无HDR,效率:;6.4kb
通过计算机预测非靶向插入
hp-sgRNAs