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Antibiograma (Epsilon Test)
La prueba ha sido exitosamente utilizada contra microorganismos aerobios, anaerobios, organismos de difícil crecimiento y de crecimiento lento como H. influenzae, S. pneumoniae, Neisseria spp. Legionella spp.
Cuando el antibiótico difunde en el agar, establece un gradiente continuo de antimicrobiano a lo largo de la tira y después de la incubación se forma una zona elíptica de inhibición del crecimiento.
Resultados
Después de incubar aparece un halo de inhibición de forma elíptica.
En nuestro caso, la tira era de amoxicilina, cuya concentración mínima inhibitoria (C.M.I.) es de 2 μg/mL.
Procedimiento
Inocular la superficie de una placa de agar de Müeller-Hinton con el hisopo, pasándolo uniformemente por toda la superficie en tres direcciones. Por último pasar
el hisopo por el reborde la placa de agar. Dejar secar 5 minutos.
Sumergir, en el inóculo, un hisopo de algodón y eliminar el exceso presionándolo sobre la pared interna del tubo que lo contiene y por encima del nivel del caldo de cultivo.
se deposita la tira y se deja incubar a 37ºC durante 18 ó 24 horas..
Se prepara un inoculo bacteriano, que tenga una turbidez equivalente al 0,5 de la escala de McFarland, para ello cogeremos unas 3-4 colonias y las resuspenderemos en 3-4 ml de suero.
Incubar la placa en posición invertida a 37° C durante 18-24 horas.
Se prepara un cultivo de 18 horas, de las bacterias que hay que ensayar, en agar.
Medir los diámetros de las zonas de inhibición con una regla o un calibrador,
utilizando luz reflejada sobre fondo negro.
Materiales y reactivos
• Asa de siembra
• Hisopo de algodón
• Suero fisiológico
• Inóculo bacteriano
• Medio Müeller-Hinton
• Agar TSA
• Discos con antibiótico
• tiras de Epsilon-Test.
La técnica, que se emplea, es similar a la de difusión en agar pero en lugar de discos utiliza tiras de E-test
PERCY WILFREDO LOZA RAMOS
