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TÉCNICAS BIOQUÍMICAS (I) 1.4 Espectroscopia de emisión atómica: fotometría…
TÉCNICAS BIOQUÍMICAS (I)
1.4 Espectroscopia de emisión atómica: fotometría de llama
1.4.1 Fundamento
La espectrofotometría de emisión atómica se basa en el fenómeno de emisión de luz por un átomo excitado
La fotometría de llama utiliza el calor aplicado mediante llama para producir la atomización y la excitación atómica
La intensidad luminosa es directamente proporcional al numero de átomos que emiten energía
Solo se excitan del 1 al 5% de los atomos
Colores de la llama
Litio (rojo) 671nm
Sodio (amarillo) 589nm
Potasio (violeta) 768
Cobre (azul)
1.4.2 Aparataje
Los componentes básicos de un fotómetro de llama son
Atomizador
Consiste en disminuir el tamaño inicial de las gotas de la disolución problema para permitir que los átomos de la muestra absorban la energía térmica y se exciten
Quemador
Proporciona una llama que debe poseer una temperatura adecuada y constante que permita la transferencia de energía a los atomosno excitados
La llama tienes tres funciones basicas
Excitar estos átomos
Descomponer los compuestos moleculares en átomos individuales
Permite pasar la muestra a analizar del estado liquido a gaseoso
El gas utilizado suele ser propano, gas natural o acetileno, mezclado con aire u oxigeno
La llama de oxido nitroso-acetileno y la de aire-acetileno son las mas adecuadas parala fotometría de llama
Partes de la llama
Zona interconal; en esta se produce una combustión completa y la temperatura que se alcanza es máxima
Cono exterior
Zona de combustión primaria o cono interno
Sistema óptico
Sistema de registro
Detector
1.4.3 Aspectos prácticos
Pueden aparecer una serie de interferencias que pueden provocar la obtención del resultado erróneos
interferencias de radiación
Existe algún elemento que provoca una radiación de longitud de onda parecida a la del analito a determinar
Solución: emplear monocromadores
Interferencias de excitación
Se excitan otros átomos y transfieren la energía al analito que medimos
Solución: se añade una concentración elevada de un metal que normalmente no se encuentre en la muestra
Interferencias de fondo
La muestra contiene concentraciones altas de proteínas, lípidos o hidratos de carbono
Solución: Empleando altas diluciones de la muestra
Interferencias químicas
Son debidas a la presencia de compuestos de calcio aislados que impiden que los átomos de calcio se exciten
Solución: Añadir lentamente lantano que reacciona con el fosfato