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Técnicas de análises de DNA e RNA - Coggle Diagram
Técnicas de análises de DNA e RNA
PCR
Componentes
Água
A necessidade de água ‘isenta de nuclease’
Nucleotideos
Para a TAQ polimerase preencher a nova fita
Taq polimerase
A polimerase é uma bactéria (
thermus aquaticus
). Suporta altas temperaturas (94-96ºC)
Primers
Pequena sequência de nucleotídeos para iniciar a polimerização
Fita de DNA
Fragmentos da fita com o genoma de interesse
Tubo de PCR
Onde vão os fragmentos de DNA, primers, nucleotídeos e outras substancias
Mix Buffer
Substância tampão (manter Ph adequado)
Processos
1- Desnaturação
A dupla fita do DNA é desnaturada (aberta).
2- Anelamento
dos primers
Os primers se anelam as fitas de DNA que foram desnaturadas (55-65ºC).
3-Extensão
Momento em que a Taq polimerase vai polimerizar os nucleotídeos e fazer copia da fita molde.
QPCR
Real Time Quantitative
PCR em tempo real
PCR
Fluorescência
Tempo real
Resultados
Marcação
Saiba mais
RT-PCR
Teste COVID-19
Transformação de RNA em DNA
DNA é amplificado
Presença de SARS-COV-2
Sondas emitem sinal
Eletroforese
P. 1
Gel 🧊
Fita (Isolamento 🩹)
Pente (Covas gel 🎛)
Tipos
Agarose
Poliacrilamida
Despejo
Secagem
P. 2
🩹Fita e Pente⚔
Retirada
Inserção
Cuba eletrônica
Sol. Tampão
P. 3
Sonda 💉
Injeção
DNA
Covas do gel 🎛
P. 4
🧬DNA
Eletrodo -
Para
Eletrodo +
Cuba lig. 🔋
P. 5
Fluorescência ☢
Fotografia 📸
Bandas
Marcação
Peso Mol.
Brometo
Southern Blotting
1
fragmentação
DNA 🧬
2 Eletroforese
3 Transferência
membrana ⬇
cubavvv
Esponja
Sol. Tampão
gel agarose
Membrana
papeis filtro
4 Sonda 📨
saco plásticos
Sequencias DNA
Membrana
🧬5 Hibridização
Une DNA
Sequencias
complementares
6 Lavagem💧
7 Detecção 📸
Autorradiografia☢
Bandas
gel 🧊
agarose
Northern Blotting
RNA
Western Blotting
Proteínas
Análise de polimorfismo no DNA
Baseados na Hibridização
Baseados em PCR
Baseados em Sequenciamento