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Introducción a los métodos de separación - Coggle Diagram
Introducción a los métodos de separación
En 1906, el botánico Ruso M. Tswett realizó un experimento que condujo al descubrimiento de lo
que hoy conocemos como cromatografía.
Un rasgo característico de la cromatografía es la presencia de dos fases;
dispuestas de tal manera
que mientras una permanece estacionaria dentro del sistema (fase estacionaria),
la otra se desplaza a lo
largo de él (fase móvil)
Métodos de separación
Cromatografía en papel
La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar análisis cualitativos ya que pese a no ser una técnica potente no requiere de ningún tipo de equipamiento
La cromatografía en papel es una técnica utilizada para análisis inorgánico cualitativo, permite llevar
a cabo la separación e identificación de iones, trabajando con cantidades mínimas de sustancia.
Cromatografía en capa fina
La cromatografía en capa fina se basa en la preparación de una capa, uniforme, de un adsorbente mantenido sobre una placa de vidrio u otro soporte.
La cromatografía en capa fina presenta una serie de ventajas frente a otros métodos cromatográficos (en columna, en papel, en fase gaseosa) ya que el utillaje que precisa es más simple.
Cromatografía de permeación en gel
La cromatografía de permeación en gel, también conocida como cromatografía de exclusión es una variante de la CLAE que consiste en una columna cromatográfica empacada de tal manera que las partículas de dicho empacamiento tienen diferentes tamaños de poros o de redes de poros con el fin de que las moléculas de soluto sean retenidas o excluidas basándose en su forma y tamaño y no en el peso molecular.
Empaquetamientos de columna.
Existen distintos tipos de empacamientos columna. Entre ellos están los polímeros macromoleculares semirrígidos, los entrecruzados, las sílices rígidas ó las de “poro controlado”.
Cromatografía de exclusión de iones
Una variante de la cromatografía de permeación en gel o cromatografía de exclusión, es cuando se realiza para la exclusión de iones.
Cromatografía de intercambio iónico
La cromatografía de intercambio iónico se lleva a cabo con empaques de columna que tiene grupos funcionales cargados unidos a una matriz polimérica.
Aplicaciones de intercambio catiónico:
Los cationes inorgánicos se pueden determinar en alimentos, tales como los alimentos dietéticos bajos
en sodio, y en muestras de orina.
Aplicaciones de intercambio aniónico:
Se pueden separar los ácidos HCN, carbónico, silícico y bórico de los ácidos fosfórico, sulfúrico y
clorhídrico. Los metales que forman complejos cloruro y floruro
Cromatografía de fluidos supercríticos
La temperatura crítica de una sustancia es la temperatura por encima de la cual no puede existir en la fase líquida independientemente de la presión. La presión crítica es la presión de vapor de una sustancia a su temperatura crítica. Una sustancia a temperaturas y presiones por encima de su temperatura y de su presión crítica (punto crítico) se denomina fluido supercrítico.
Fases móviles
La fase móvil más utilizada en SFC es el CO2. Es un disolvente excelente par un conjunto de
moléculas orgánicas no polares. Además, es una sustancia transparente en el ultravioleta, es colora, no
Detectores.
La principal ventaja de la SFC frente al HPLC es que se pueden utilizar como en la cromatografía de gases, detectores de ionización de llama.
Fases estacionarias
En SFC se emplean tanto las columnas abiertas como las columnas rellenas, aunque las primeras son las más empleadas.
Cromatografía de afinidad
La cromatografía de afinidad separa las proteínas (analitos) en función de su especificidad de fijación de ligandos. Los ligandos de afinidad son moléculas poliméricas que sirven de soporte porque están unidas covalentemente sobre la columna cromatográfica o matriz inerte que debe de tener una estructura de poro abierta y estabilidad en condiciones de cambio de pH, detergentes y agentes disociantes, para así, retener y adsorber específicamente a las proteínas, la fase estacionaria es sólida.
Cromatografía de líquidos de alta resolución
La cromatografía de líquidos de alta eficacia es la técnica analítica de separación más ampliamente utilizada. Las razones son la sensibilidad, su fácil adaptación a las determinaciones cuantitativas exactas, es ideal para la separación de especies no volátiles o termolábiles y por su gran aplicabilidad a sustancias que son de interés en la industria.
Electroforesis
El fundamento de la técnica consiste en depositar sobre un medio poroso una mezcla de especies cargadas. Por aplicación de un campo eléctrico entre los extremos del soporte poroso las especies se separan en función de sus cargas y su movilidad iónica en ese medio. Cuanto más elevado sean el voltaje y la intensidad en menos tiempo se produce la separación
Electroforesis capilar
La sección transversal del aparato de electroforesis se puede reducir se forma drástica al realizar a electroforesis en el interior de un tubo capilar de diámetro interno menor a 0.1mm y una longitud de
50cm a 1m.
Aunque los principios fundamentales son los mismos, se acostumbra clasificar los métodos
cromatográficos según el estado físico de la fase móvil:
Cromatografía líquida. La fase móvil es un disolvente o mezcla de disolventes y la fase estacionaria un sólido que interactúa con las sustancias que se desea separar (cromatografía líquido-sólido), o bien un líquido inmiscible con la fase móvil, depositado en la superficie de un sólido (cromatografía líquido líquido). Esta forma de cromatografía puede realizarse con diferentes arreglos experimentales: en columna, en capa delgada o en papel.
Cromatografía de gases. En este caso la fase móvil es un gas inerte (helio o nitrógeno) y la fase estacionaria es un sólido (cromatografía gas-sólido) o un líquido “sostenido” por un sólido inerte (cromatografía gas-líquido). Este tipo de cromatografía siempre es en columna, ya que es la única manera de que la fase móvil gaseosa se mantenga fluyendo, confinada dentro del sistema.