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Técnicas básicas de microbiología, procedimiento que permite preservar…
Técnicas básicas de microbiología
Métodos y técnicas para la observación de microorganismos
Tinción
Positiva
anilinas, sales orgánicas
Colorantes Básicos
Cristal violeta
azul de metileno
cromoforo +
Colorantes ácidos
rojo Congo
rosa de bengala
eosina
fuchina ácida
cromoforo -
Negativa
nigrosina (tinta china)
Fondo oscuro y microorganismos brillatnes
Diferencial
aplicación de dos colorantes que contrastan en su intensidad o color para identificar microorganismos distintos
Tinción de Gram
Gram-
Gram +
Tinción ácido-alcohol resistencia
AAR
NO ARR
Estructurales
Capsulas
rodea externamente la pared de algunos microorganismos
barrera física de protección
Tinción negativa
Esporas
resistencia producida por algunos géneros de bacterias gram +
Schaeffer Fulton
El calor modifica la permeabilidad de la endospora y permite
la entrada del colorante
Microscopio
MICROSCOPÍA CONFOCAL (Confocal Laser Scanning Microscopy)
mayor contraste y elevada resolución, especialmente en aquellas células marcadas con fluorescencia
Sondas específicas y FISH (Hibridación in situ con sondas moleculares fluorescentes)
Obtención de anticuerpos a proteínas específicas o fragmentos de ADN o ARN
Fijación
Calor
Bacterias
preserva la morfología externa
elimina las estructuras internas.
Química
etanol, formaldehido y ácido acético
preserva las estructuras celulares
"In vivo"
Gota pendiente
morfología
tamaño
color
movilidad de
las bacterias.
Con Flagelo
Rápido y rectilineo o giros
Inmoviles
Mov. Browniano
Observación directa en contraste de fases
observación 3D
Microscopio de contraste de fases
aumento de contraste
Esporas
Inclusiones
Filamentos septados
vainas
procedimiento que permite preservar estructuras celulares
incrementar el contraste entre la célula y
su entorno
Observación
pared celular
Decoloración