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Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico, ffff - Coggle Diagram
Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico
El concepto de diagnostico molecular es un termino amplio que incluye técnicas de biología molecular en beneficio de la salud humana detectando y/o cuantificando secuencias genéticas especificas de ADN, ARN o proteínas.
El campo del diagnostico molecular ha tenido un amplio crecimiento en los últimos años, tiene un alcance al mercado en unos us$ 60 billones
Una de las principales limitaciones de estas técnicas eran los
días de arduo trabajo con personal de alto desarrollo técnico, lo que impedía su aplicación masiva en la práctica clínica de rutina.
Las técnicas de biología molecular se basan en la detección de ADN, no es necesaria la presencia de un microorganismo viable en la muestra, si no del material genético
El diagnostico molecular se ha enfocado principalmente en el diagnostico de enfermedades infecciosas en un (50-60%), existe un aumento progresivo de técnicas moleculares en el área de cáncer y enfermedades genéticas
Kary B. Mullis recibió el premio Nobel de química en el año 1993 por diseñar la reacción de la polimerasa en cadena RPC
RPC múltiple, amplificación de 2 o mas segmentos de ADN utilizando varios partid6res de una sola reacción
RPC-RFLP, estandar con paso posterior de digestion de enzimas de restrinccion
RT-RPC, Síntesis de cADN a partir de ARN, mediante trancision reversa, seguido de un RPC
RPC-TR, RPC estándar donde se utiliza tinciones o sondas con fluoróforos, para la detección de los fragmentos amplificados.
RPC estándar, amplificación de un segmento de ADN, utilizando dos partidores. es mediante de geles de agarosa.
La RPC viene dada por la hibridación de los partidores complementarios de la secuencia blanco y su elevada sensibilidad a la baja cantidad de ADN.
La investigación básica en conjunto con el desarrollo tecnológico, ha permitido el diseño de instrumentos y métodos para responder a las necesidades clínicas
En el caso del diagnostico molecular la detección de ADN, fue la primera estrategia utilizada en clínica, mediante técnicas utilizadas de hibridación de Southern blot, utilizando fragmentos del ADN, denominadas sondas.
la utilización de células de restricción, tijeras moleculares que cortan el ADN en regiones específicas, junto con el desarrollo de métodos
de secuenciación simples, amplio el uso de técnicas.
Las técnicas de Southern blot se convirtieron en el gold standard para la
detección de reordenamiento de los genes que codifican ,para las cadenas ligeras y pesadas de las inmunoglobulinas,
así como también la familia de receptores de células T.
