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MEDIOS DE CULTIVO MICROBIANO - Coggle Diagram
MEDIOS DE CULTIVO MICROBIANO
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean condiciones necesarias para el desarrollo de microorganismos.
Preparación
3. Vertido en placa
Previamente, entremezclar el medio de manera uniforme.
Verter el medio a las cajas petri a la temperatura de vertido.
Eliminar las burbujas de aire de la superficie de la placa, abanicando brevemente sobre una llama de un mechero.
2. Esterilización
Enfriar los recipientes a temperatura de vertido entre 45ºC-50ºC.
Esterilizar el medio en el autoclave a 121ºC/15Libras de presión/15min.
Antes de esterilizar, se debe repartir el medio en los recipientes.
4. Tubos de agar inclinados (bisel o pico de flauta)
Los tubos con medio de cultivo, todavía líquido, se inclinan para formar una placa de 3cm y una superficie inclinada.
Los medios que no requieren inclinación, se dejan solidificar en posición vertical.
1. Disolución del medio de cultivo deshidratad
o
Añadir al medio la mitad de agua y homogeneizar. Luego el agua restante.
Calentar el medio lo estrictamente necesario.
Usar recipientes grandes para agitar el medio.
Confirmar la disolución completa cuando no se adquiere ninguna partícula al envase.
Emplear agua destilada o desmineralizada y pH neutro.
Si la preparación es de más de 2L :
Desleír el medio en una décima parte de la cantidad de agua durante 15 minutos.
Calentar a ebullición el agua restante y agregar al medio remojado con constante agitación.
Calentar hasta su completa disolucion.
Defectos en la preparación
Turbidez
Escasa estabilidad del gel
Desviación del pH
Contaminación
Apelmazamiento de los medios de cultivo deshidratados
Colonias inconcretas o diluidas
Los principales nutrientes para el desarrollo de los microorganismos son:
Factores de crecimiento
Fuente de energía
Fuente de nitrógeno
Fuente de carbón
Agua
Base mineral
Micronutrientes
Elementos traza
Macronutrientes
Condiciones fisicoquímicas
Según su finalidad
Selectivo-deferenciales
Además de la selección de un tipo de bacterias, se logra información sobre sus características metabólicas.
Medio de Telurito
:
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Medio de Sabouraud
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Agar EMB (Eosina Azul de Metileno)
:
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Agar SS (Salmonella-Shigella):
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Agar McConkey
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Diferenciales
Permiten distinguir grupos de microorganismos poniendo en evidencia diferencias en la actividad metabólica, a través de la incorporación de distintas sustancias.
Clostridios Diferencial Agar
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Selectivos
Permiten el crecimiento de un microorganismo de interés en una muestra inhibiendo al resto.
TCBS Medio
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Violeta Rojo y Bilis Glucosa Agar
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Centrimida agar base
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Simples u ordinarios
Sus nutrientes permiten el crecimiento de gran número de microorganismos, pero no de los que requieren nutrientes particulares.
Caldo nutritivo
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Agar base sangre
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Agar nutritivo
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De enriquecimiento
Permiten la multiplicación de los microorganismos de interés
desfavoreciendo la microbiota acompañante.
Agua peptonada
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Enriquecidos
Contienen los nutrientes ausentes de los medios ordinarios, como por ejemplo factores orgánicos de crecimiento.
Agar chocolate
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Medio de tioglicolato
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Agar sangre
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Según su estado Físico
Liquido
No llevan adicionados agentes solidificantes, Ejemplo: Agua de peptona.
Permiten aumentar el número de microorganismos.
Solido
Contienen el agente solidificante (generalmente agar al 1,5-2%)
Se utilizan para aislar microorganismos.
Semisólido
Presentan la característica de contener agar en baja
concentración (0,2%).
Se utilizan para conocer el comportamiento de los microorganismos frente al oxígeno y su movilidad.
Según su Composición
Indefinidos
Agar nutritivo preparados con mezclas de nutrientes como peptonas, extracto de carne, extracto de levadura, agar-agar, etc.
Medio complejo, en el que no se conoce su composición exacta.
Definidos
Medio sintético, en el que se conoce su composición exacta
Se utilizan componentes de alta pureza, por lo que se conoce su composición química (cualitativa y cuantitativamente).
Naturales
Medios preparados a partir de sustancias naturales. Ejemplo: Agar de zanahoria, papa.
Enriquecidos
Medios a los que se le adicionan factores de crecimiento (vitaminas, cofactores). Ejemplo: Agar sangre.
Comunes
No hay factores de crecimiento y se utilizan para aislar microorganismos poco exigentes. Ejemplo: Agar nutritivo.
El objetivo de un medio es añadir todos los componentes necesarios para permitir el crecimiento de los microorganismos que se desean aislar.
