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單株抗體及其應用發展 - Coggle Diagram

- - - - Ex:
        
        參與腫瘤癌化的細胞訊息傳遞的Tyrosine激化酶。
    - - Ex:
        
        造血幹細胞(hematopoietic)來源者。
      - 特色
        
        在腫瘤細胞之表面均會過量表現
    - - 內容
        
        以腫瘤的血管作為標的，加以抑制
      - 優點
        
        (1) 抗原在腫瘤內皮細胞(endothelium)穩定表現，不太容易產生抗藥性。
        
        (2) 適用於各種腫瘤。
        
        (3) 對正常細胞無毒害。
        
        (4) 更能有效阻止癌細胞移轉(metastasis)所造成的癌細胞擴散現象。
    - - 內容
        
        只在胚胎時期會短暫表現，成體不表現，
        但在癌細胞中又再度不正常表現的蛋白質。
    - - 原因
        
        腫瘤細胞間質與癌細胞之間的關係密切
    - - 目的
        
        直接阻撓蛋白質的功能
        
        毒弒腫瘤細胞
      - 方式（加料）
        
        放射性標記的抗體
        
        方式
        
        將放射性物質與抗癌抗原的抗體結合
        
        目標
        
        讓抗體把放射性物質帶至癌細胞，並將癌細胞殺死。
        
        缺點
        
        放射性物質毒害作用
        
        影響對象
        
        正常器官
        
        代謝器官
        
        免疫毒素
        
        方式
        
        將生物性的毒素蛋白與抗體結合，利用抗體將毒素帶至癌細胞
        
        缺點
        
        抗體能攜帶其物的劑量十分低，對於惡性腫瘤的清除仍不太有效
        
        攜帶藥物前驅體(precursor)
        
        方式
        
        將藥物前驅體分子與抗體結合，當抗體到達癌細胞之後，
        藥物前驅體分子即可進入細胞，並轉變成真正的藥物，
        進而清除惡性腫瘤
        
        免疫酵素
        
        方式
        
        將酵素與抗體結合，讓抗體攜帶酵素至腫瘤，
        然後施以藥物前體(prodrug)，
        酵素即可在細胞上將藥物前體轉化成為真正的藥物
- - - - 用來鑑定在血液或組織中特殊抗原或抗體的單株抗體
      - 作用
        
        確認病因或病情
  - - - 多腫瘤細胞都會自行分泌特定的抗原
      - 作用
        
        辨認組織是否已癌化
        
        辨認處於癌變的何種時期
  - - - 能夠分辨這些細胞表面不同特定標記
    - - 能夠分辨這些細胞表面不同特定標記的單株抗體
  - - - 單株抗體能與細胞表面分子結合
      - 作用
        
        刺激或抑制某些細胞功能
      - 目的
        
        瞭解該分子在細胞功能上所扮演的角色
- - - - 異種間重組的單株抗體
  - - - 老鼠
      - *人類的B細胞株十分不穩定，不如老鼠的B細胞株，只能產生少數的抗體
    - - 被人體免疫系統排斥
    - - 腎臟移植
      - 目的
        
        避免外來器官移植時原器官急性排斥情形
      - 原理
        
        病人已經施以其他降低免疫反應藥物，免疫力極低，體內的免疫反應十分不靈敏，因此不會將之排除
  - - - 遺傳
    - - 老鼠嵌合式(chimeric)
        
        做法
        
        取老鼠的抗體變異區接在人類的固定區
      - 人類化(humanize)
        
        做法
        
        採用了老鼠抗體的抗原決定區。
- - - - 人類化單株抗體技術
      - 內容
        
        以人的抗體在基因轉殖動物或噬菌體上表現
- - - - 針對某種特定抗原而不斷生產出的抗體
    - - 對抗或幫忙排除身體內的入侵或異常的物質
    - - 單株抗體大多是重組蛋白質，不一定要使用細胞株來培養
- - - - 骨髓(bone marrow)中的造血幹細胞(hematopoietic stem cell)
    - - 細胞免疫
      - 體液免疫
    - - 血球細胞(myeloid)
      - 淋巴細胞(lymphoid)
        
        B淋巴細胞（B lymphocyte，簡稱B細胞）
        
        T淋巴細胞（T lymphocyte，簡稱T細胞）
    - - B cell
        
        情境
        
        遇及抗原
        
        反應
        
        基因重組來合成特定的抗體以對抗這個抗原
        
        特色
        
        每個經過抗原的誘導所產生的抗體只針對抗原的一個epitope
        
        名稱
        
        單株抗體(monoclonal Ab)
        
        抗體類別
        
        IgA
        
        可出現於
        
        唾液
        
        眼淚
        
        乳汁
        
        IgE
        
        相關疾病
        
        過敏反應
        
        IgG
        
        作用
        
        主要對付外來抗原的能力
      - 抗血清(anti-serum)
        
        特色
        
        對抗同一個抗原（多個抗原決定位(epitope)）
        
        名稱
        
        多株抗體(polyclonal Ab)
- - - - 使用原因
        
        細菌並沒有醣化作用(glycosylation)，
        無法對人類蛋白質產生正確的修飾
      - 類型
        
        抗體片段
        
        特色
        
        因其分子較小對於腫瘤細胞的穿透性可能較佳
        
        整個抗體
        
        使用時機
        
        考慮進入人體後的穩定性等因素時
    - - 缺點
        
        酵母菌中的醣化作用與哺乳動物類差異很大
        
        影響
        
        產生出的人類蛋白質分子不一定會有正確的結構。
    - - 地點
        
        中國鼠卵巢細胞株（Chinese hamster ovary，簡稱CHO）
        
        小鼠骨髓瘤細胞株（mouse myeloma，簡稱NS0）
    - - 實際應用
        
        CHO或NS0細胞株
        
        方式
        
        永久細胞株
        
        流程
        
        將帶有重組抗體基因的質體送入細胞中
        
        使之基因插入宿主染色體中
        
        篩選
        
        目標
        
        永久持續表現這種重組抗體
        
        輔助
        
        表現量較佳的插入位置
        
        缺點
        
        成本昂貴
        
        優點
        
        平穩而安全
      - 前言
        
        完整的抗體是較複雜的分子，因此細菌較難產生抗體分子
    - - 優點
        
        物美價廉
      - 使用時機
        
        需求量十分大的抗體
    - - 製作方式
        
        基因槍
      - 遇及問題
        
        ~酵母菌
        
        內容
        
        蛋白質修飾差異的問題
        
        醣化作用的結果有差異
      - 優點
        
        結果（抗體）特性與原目標相似
        
        成本更低廉
    - - 類別
        
        改良式篩選單株抗體的技術
        
        重組抗體的技術
      - 篩選方式
        
        體外(in vitro)篩選
        
        目標物
        
        噬菌體、細菌及酵母菌中表現的重組抗體
        
        類別
        
        以抗原去篩選抗體的方式
        
        以生物晶片的方式
      - 實例
        
        噬菌體表現的抗體基因庫(phage display library)
        
        身份
        
        表現人類單株抗體的噬菌體
        
        製作流程
        
        老鼠以特定抗原處理
        
        脾臟細胞中某些B細胞的抗體
        基因變異區即會發生基因重組
        
        以PCR方式大量繁殖其cDNA
        以取得所有B細胞的抗體基因變異區部分
        
        將其與噬菌體外套蛋白基因（phagemid）接在一起
        
        將其mRNA製成cDNA
        
        目的
        
        產生對抗此抗原的抗體
        
        得到有關其反應最佳的抗體變異區基因
        
        材料種類
        
        10^7~10^9個噬菌體種類
        
        應用
        
        細菌釋出這些噬菌體
        
        篩選出可與原本抗原反應的抗體
        
        讓表現在phagemid上的抗體表現在噬菌體的表面
        
        用trypsin將其噬菌體回收
        以便後續操作
        
        將製作過的phagemid送入細菌
        
        使用
        
        加入Help phage
        此library則會產生此類病毒
      - 傳統
        
        流程
        
        脾臟細胞中某些B細胞的抗體
        基因變異區即會發生基因重組
        
        將此脾臟細胞組織與骨髓瘤細胞融合
        
        老鼠以特定抗原處理
        
        篩選
        
        名稱
        
        融合瘤。