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METODI SEQUENZIAMENTO - Coggle Diagram
METODI SEQUENZIAMENTO
METODO SANGERS
SEPARO IL DNA E FORMO IL DNA COMPLENTARE
PRIMER
DNA POLIMERASI
FRAMMENTO DI DNA
DIDESOSSIRIBONUCLEOTIDI
NUCEOTIDI FLUORESCENTI CON FLUORESCENZA DIVERSA IN BASE AL NUCLEOTIDE CHE PORTANO
TERMINATORE
NON HA OH IN POSIZIONE 3 DELLO ZUCCHERO QUINDI NON POTRA CONTINUARE L'AGGIUNTA DEI NUCELOTIDI
A SECONDA DEI DIDESOSSI AVRO PUNTI DI TERMINAZIONE DIVERSI DELLA CATENA DI DNA
FRAMMENTI OTTENUTI FACCIO ELETTROFORESI DETERMINANDO LA POSIZIONE DEI NUCLEOTIDI
NUCLEOTIDI
PROGETTO GENOMA UMANO
WATSON ---> 1900-2003
SEQUENZIAMENTO DNA
280000- 30000 GENI
150000 PROTEINE
OLTRE IL 95% E FATTO DA SEQUENZE NON CODIFICANTI OVVERO DA INTRONI ----> DNA SPAZZATURA
METODO MAXAM
NON SI BASA SULLA REPLICAZIONE
UTILIZZA LA DEGRADAZIONE DEL DNA
IL DNA VIENE MARCATO CON FOSFORO RADIOATTIVO E VIENE POI DENATURATO
4 PROVETTE CON 4 MISCELE DIVERSE
OGNI PROVETTA VIENE TRATTATA CON COMBINAZIONI DIVERSE DI SOSTANZE CHE TAGLIANO IL DNA IN PUNTI DIVERSI
POI ELETTROFORESI SU GEL E SEPARO LE MOLECOLE DEL DNA FACENDO LA COPIA COMPLEMENTARE
METODI DI SEQUENZIAMENTO
METODO DI SANGER
MAXAM