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La réplication de l'ADN (Les étapes de la répication (Terminaison (ADN…
La réplication de l'ADN
Semi-conservative (expériences de Meselson et Stahl : 1958)
La réplication semi-conservative est celle utilisée par tous les procaryotes et les eucaryotes. Elle se caractérise par la conservation d'un brin d'ADN parental et d'un brin d'ADN néo-synthétisé, chaque brin parental est utilisé comme matrice pour la synthèse d'un nouveau brin de manière complémentaire et antiparallèle à ce brin matrice.
Substrats : déxyribonucléosides-5'-triphosphates (dNTP)
Les étapes de la répication
Elongation (ensemble des protéines : réplisome)
La réplication se propage simultanément à droite et à gauche du point d'initiation de la réplication appelé l'origine de réplication.
Il se crée deux fourches de réplication qui se propagent dans des directions opposées.
La synthèse de l'ADN est continue pour un brin (brin avancé) et discontinue pour l'autre brin (brin retardé)
Brin retardé : addition successive dans le sens de propagation de la fourche de réplication de petits fragments d'ADN (fragments d'Ogasaki). Ces fragments sont ensuite liés les uns aux autres pour former une chaîne continue.
Terminaison
ADN circulaire, la terminaison est généralement réalisée lorsque les deux fourches de réplication se rencontrent.
ADN linéaire : les fourches de réplication s'arrêtent soit lorsqu'elles rencontrent une autre fourche de réplication, soit lorsqu'elles arrivent à l'extrémité du chromosome.
Initiation (ensemble des protéines = primosome)
Amorce 3'OH : court fragment d'ADN synthétisé par une ADN primase
Polymérisation des nouveaux brins de 5' vers 3'
Procaryotes
E.coli : une seule origine de réplication
ADN hélicase ouvre la double hélice ce qui crée des supertours
Supertours éliminés par l'ADN gyrase
Amorce synthétisée par la primase
ADN polymérase III synthétise le nouveau brin d'ADN
Elimination des amorces ARN et comblage des vides par l'ADN polymérase I (activité exonuclésique 5'-3')
Les fragments d'ADN synthétisés sont ensuite liés de manière covalente par une ADN ligase, enzyme capable de former une liaison phosphodiester
Les fourches de réplication se rejoignent et sont "piégées" par des séquences appelées "séquence s terminatrices"
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Fragments d'Okasaki (1000 à 2000 nucléotides)
Protéines SSB stabilisent et protègent la zone simple brin
500 à 1000 nucléotides par seconde
Eucaryotes
Multiples origines de réplication
ADN hélicase ouvre la double hélice
Amorce ARN par l'ADN polymérase alpha
20 premiers nucléotides synthétisés par l'ADN polymérase alpha
ADN polymérase delta, plus stable prend le relais.
Protéines SSB (protection des régions monocathénaires)
Fragments d'Okasaki (100 à 200 nucléotides)
L'enzyme RNase H élimine les amorces
ADN polymérase delta comble les vides
ADN ligase lie de manière covalent les fragments d'ADN
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