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La Membrane (Système membranaire (Ribosome (ARNt (Struct théorique (En…
La Membrane
Système membranaire
MP et endomembranes
Pts communs
Agencement
Bicouche lipidique où s'insèrent les prot
Structures
Constituants
Glycolipides
Protéines
Lipides
Glycoprotéines
Epaisseur
7nm (6-8nm), MET, MEB
Modèle de mosaïque fluide
Hétérogène
Déformable
Renouvellement
Mouvement
Asymétrique
Lipides
Carac par
49% des lip dans Mb
Diff types de lip
Phospholipides
Carac par
Amphiphiles
1 part polaire et l'autre apolaire
Les + connus
Phosphoglycérides
Sphingolipides
Rigidité
Stérols
Carac par
Cholestérol
Stabilité
Glycolipides
Carac par
Dans MP
Diff types
Sucres
Glycérol
Propriétés
Polymorphisme en phase aqueuse
Selon long des chaines et C°
Liposomes
Permet d'étudier la fluidité membranaire
Mouv des lipides
Bougent soit
Latéral
Rotation
Bascule
1 more item...
Imperméabilité
Mol hydrophiles
Protéines
Carac par
43% des prot dans MB
Plus ou moins insérées
Diff types de prot
Périphérique
Intrinsèque
Prot transmembranaire
Propriétés
Spécificité
Confrères aux Mb des prop spé
Récepteurs/Transporteurs
Mobilité
Dep de la mobilité des lip
Tech de cryofracture en ME
1 Congeler les cellules
2 Fracturer la membrane
3 Remplir la MB de carb
4 Accumulation de prot dans la MB
A la fin on va pouvoir obs où étaient les prot
Immobilité pour certaines
Mol adhérence
Réseau cytosquelette
Complexes macromoléculaires
Glucides
Carac par
Donne prop aux MB
Reconnaissance
Environnement local
Renforcement
Spécialisation de la MP
Aug de la surf d' :recycle:
Microvillosités
Expansion cytoplasmique cylindrique de diam 0,1/ L 0,5-2microns
Replis basaux
Augmentent la surf pour abs et trans des mol
Invaginations de la MP
Les Mitochondries s'assoc à eux et leur fournissent de l'E
Relations intercel
Jonctions cellulaires
Carac par
Communication cellulaire
Cohésion cellulaire
Différents types
Jonctions d'adhérence
Jonctions serrées
Zonula occludens
C épithéliale de l'intestin
Jonctions desmosome
Jonctions très fortes que l'on trouve dans Z soumise à agressions
Jonctions de communication
Jonctions hémidesmosome
Localisation spé de diff prot
C polarisée
C éptihéliale
C intestinale
Neurones
Fonctions de la MP
Barrière sélective z ext et int de C
Rôle dans les :recycle:
Transports de mol via des vésicules
Trans membrane
Entrée mol/métbol
Rejet déchets/sécrétion molécules
Trans par voie vésiculaire
Trans actif
Ut avec E
Demande de l'E par la cellule
ATP
Gradient ionique
Se fait contre le gradient de C°
Primaire
Pompe Na+/K+
Se fait par 1 prot transmembranaire
Mécanisme
Na
Hydrolyse ATP
Changement conformation/Libération Na ext
Fixation 3 Na+ et ATP int
K
Hydrolyse/Déphosphorylation
Changement conformation
Libération K int
Fixation 2K+ext
Trans passif
Ut sans E
Diffusion simple
Abs de spécifité
Vit de diffus° ef de leur taille et de la solubilité ds les lip
Tendance à l'éq des C°
Mol hydrophobes ou petites polaires
Diffusion facilitée
Canaux ioniques
Voltage
Pour qu'il soit, il faut 1 chang_ de polarité membranaire Na+
Canaux protéiques
Mol hydrophiles eau
Ions
Perméase
Trans spé du glucose
3 étapes
Complexe
Translocation
1 more item...
Dissociation
Sature car spé
Secondaire
Glucose dans 1 sens
Na+ dans un autre sens
C intestinales
Def: Mb consti d'1 double che lipidique
Stimulat° physico-chimik
Canaux ioniques
Mb qui laissent passer des ions
Site des diff act enzymatik
Prot
Kinases
Prot qui phosphorylent
Recept° des messages
Recepteurs et transduction du signal
Récepteur associé à d'autre prot intracel
Transmission et traduction
Prot transmembranaires
Messager intracel
Amplification du signal
Ligand
1er message
Se fixe à un recepteur métabotrope
Trad du signal envoyé par le métabotrope
1 more item...
Récepteurs couplés aux protéines G
Connaitre les 2 schémas
Reconnaissance intercellulaire
Mol d'adhérence
CMH
Complexe majeur d'histocomptabilité
Ribosome
2 sites de liaison: SIte peptidyl (P) ARNt sortant/ Site Aminodacyl
Ribosome 80 S
Svedberg
2 sillons: Chaine polypetidique/Mol d'ARNm
ARNr
QQ ARN ont 1 act catalytique notamment l'ARNr (ribozyme)
Gère l'act peptidyl transférase
Consti de plusieurs chaines d'ARNt et de nombreuses prot
Fonction
Trad de l'ARNm en prot
Codons
3 nucléotides
20 AA
64 combinaisons
ARNt
De transfert
Petite molécule
Plus d'ARNt/AA
Struct théorique
En forme de feuille de trèfle
Préparation des échantillons
Etudes structurales et fonctionnelles
2 Déshydratation
Nec pour le vide en ME et pour comptabilité ac
Résines
Bains successifs d'éthanol (25-100°C) ou sublimation (congel)
3 Imprégnation et inclusion pour durcir l'échantillon
Paraffine
Résines synthétiques
1 Fixation
Arrêt du métabol et stabilisat° des struct chimiques
4 Coupes
5-20µm
Jusqu'à 60nm
5 Coloration pour identifier les struct ou act enzyme
Différentes techniques
Contraster
Atomes lourds (Nitrate de plombs et acétate d'uranyl)
Colorants vitaux
Bleu de toluidine-noyau
Vert-janus-mitoch
Techniques analytiques in situ
Histo/cytochimie
Carac par
Coloration topographique non spé
MO:Hématoxyline/éosine
MET: Nitrate de Plomb
Coloration spé d'1 struct/molécule
MO: Coloration de Feulgen pour ADN
MO: Coloration noir soudan pour les lip de myéline
Cytoenzymologie
Carac par
Détection act enz
Hybridation moléculaire
Carac par
Détect° spé d'AN par sonde d'ADNc, oligonucléotides marqués
Immunocytochimie/fluorescence
Carac par
Détection spé d'1 AG avec 1 AC spé de cet AG marqué
Fluochrome pour fluorescence
Suivi d'1 méca cellulaire
Pulse chase
MEE du cheminement de mol au cours du métabol
Pulse=marquage puis chase=Sans marquage
Marquage précurseur incorporé: Analogue thymidine
Techniques de fractionnement et d'extraction
Organes/Tissus
Disso par enz protéolytiques
Trypsine, collagénase
Cellules
Sep/ Purif par type cellulaire
Sédimentation différentielle, adhérence différentielle, trieur de C
Culture de C
Enrichissement de la pop souhaitée
Lyse MP
Organites
Sep par masse/taille
Sep par densité grâce à 1 gradient de densité
Techniques de caractérisation
Electrophorèse
Chromatographie
Centrifugation
Théorie cellulaire
Cellule eucaryote animale
Carac par
C limitée par MB
Contient du cytoplasme et noy avec MB
Contient 1 syst endomembranaire
Continuité mbs Noy et plasmique
Obs au MET
Ultrastruct
Noy: euchromatine et hétérochromatine
Eu:ADN actif, Hétéro: Repos
Diff organites
Z d'e- blanches et grises
Polysome
Ribosomes asso z eux
Diplosomes
Centrosomes
Se trouvent près du noy, C pas en train de se div
Lysosome
Vésicule
Comparaison C euca A et V
Méthodes d'ét de la morpho et fonctionnement cellulaire
Microscopie
Def: Déviation d'1 flux de part au travers d'1 syst de lentilles
Carac par
Microscopie photonique
Carac par
Transmission
Contraste de phase
Fluorescence
Epifluorescence
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Résolution: 0,2microns
But: Agrandir l'image
Microscopie électronique
Carac par
Balayage 0,5-7nm
Transmission 0,2nm
Interactions e-/mat par MEB ou MET
MEB
3 more items...
MET
1 more item...
Plus récemment
Microscopie confocale
Balayage par 1 laser
Tech d'interaction moléculaire FRET et FRAP
2 more items...
Microscopie time lapse
Microscopie à champs proche