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Tecnicas em anatomia vegetal (etapas (técnicas complementares (dissociação…
Tecnicas em anatomia vegetal
etapas
coleta e amostragem
fixação e estoque
estabelecimento dos planos de corte/ vizualização
verificação da necessidade de inclusão
escolha do metodo de seccionamento
coloração/ testes histoquimicos
montagem das laminas e registro de imagem
técnicas complementares
dissociação de epiderme
maceração (vizualização das celulas isoladas)
diafanização (estudo de venação das celulas epidermicas)
impressão de epidermes (contagem de estomatos)
fixação
função: paralisa a autolise celular
tipos de fixador: FAA50
formol
acido acetico
alcool
aldeidos
glutaraldeido
paraaldeido
tempo de fixação: 12-48h
volume de fixador: 10 * volume da amostra
estoque
etanol 70%
temperatura ambiente
tempo indeterminado
planos de cortes
transversal
longitudinal
radial
tangencial
paradermico (aleatório)
inclusão
substituição de agua por parafina/resina histologica(historesina)
função: facilita manuseio e da resistencia para a amostra
casos para inclusão
material muito pequeno
amostras muito moles
necessidade de cortes mais finos
necessidade de cortes com espessura definida
necessidade de cortes seriados
parafina mais barata que a resina
seccionamento
material incluido
microtomo rotativo
material não incluido
a mão livre
microtomo
de mesa
deslize
congelamento
coloração
dupla coloração
fuccina basica (parede secundaria)
azul de astra (parede primaria)
metacromasia(compostos reagem de forma diferente)
montagem das laminas
temporarias
agua
glicerina 50%
semipermanentes
gelatina glicerinada
permanentes
resinas sinteticas
balsamo do canada
registro de imagens
fotomicroscópico
desenho esquematico
camera clara
protocolos
manual basico de metodos em morfologia vegetal
métodos histoquimicos aplicados a sementes