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Microbiologia III Bimestre uploaded image

- - - - O poder de resolução é inversamente ao potencial de resolução, ou seja, quanto maior é o limite de resolução menor é o poder de resolução. O melhor microscópio é aquele que tem maior PODER de Resolução
    - - Base: Segura a estrutura
      - Braço: parte presa à base e segura outros constituintes
      - Tubo ou canhão: Segura as lentes exteriores (perto do olho)
      - Platina: Onde fica o material de análise, onde tem um furo no meio por onde passa a luz
      - Parafuso micro e macrométrico: Elemento de focagem
      - Revólver (Não é o do policial): peça giratória que comporta as objetivas
      - Sistema ocular e Sistema de objetivos: Sistema de lentes que garantirá o aumento da amostra, a ampliação será o produto do valor da objetiva pelo valor das oculares
      - Condensador: Lentes convergente que vai distribuir uniformemente a luz no campo de visão do microscópio
      - Diafragma: regula a intensidade de luz
    - - luz vai passar pelo condensador sendo distribuída igualmente no campo de visão, o óleo onde a amostra estará submergida não refratará a luz, direcionando ela para o conjunto de lentes, fazendo a ampliação.
- - - - Positiva
        
        Cor azul metileno
        
        Passar a amostra na lâmina, espere secar. Fixe o material usando o foco e aplique o corante
      - Negativa
    - - Estruturas: Esporos, paredes e flagelos
      - Separação de grupos
        
        Método de Gram
        
        Existem dois grupos principais de bactérias, as gram-negativas e as gram-positivas
        
        As gram-positivas: Camada mais espessa de peptidoglicano/muraína, essa é uma camada apolar. Devido a essa camada mais espessa, não apressenta patogenicidade aos seres humanos
        
        As Gram-negativas: Camada menos espessa de peptidoglicano, consequentemente pode ser patogênica
        
        Método de Gram busca fazer a identificação dos grupos de acordo com sua composição química e integridade da parede celular. Feita com corantes e especialmente feita para microscópio óptico
        
        Reagentes:
        
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- - - - Vai depender dos níveis de concentração estabelecido pelos parâmetros de qualidade
    - - São formas de exigência estudadas e fixadas-estabelecidas através de um orgão legal.
        
        No geral:
        
        Fazemos a coleta no manancial, antes do uso prévio. Essa qualidade de água vai ser definida pela CONAMA. Ainda antes do uso será feita outra análise definida pela Portaria 2.914/2011, que vai definir além de qualidade o uso daquela água
      - Os padrões definirão a qualidade da água antes de consumo prévio e antes de ser lançado de volta ao ambiente
        
        Isso define as classes de Rio: Onde a água não tem acesso à natureza exterior (fica só no subsolo) é considerada classe especial. As outras classes vão de 1 até 4 do melhor pro pior
        
        OBS: Um rio sem estudo prévio é considerado independentemente um rio de classe 2
  - - - Isso virá a partir da coleta adequada e do condicionamento adequado
    - - homogênea: gases e líquidos, nos interessa a água
      - heterogênea: sólidos
    - - Ensaios laboratoriais ----> interpretação dos resultados -----> elaboração dos relatórios ----> Tomada de decisão da qualidade
      - Exigem certas variáveis
        
        Uso da amostra
        
        Natureza da amostra
        
        Água bruta: Água ma forma que se encontra na natureza. Não significa que ela não preste para consumo, apenas que não foi trabalhada pelo homem
        
        Água tratada: É a água que foi submetida a algum tratamento buscando torná-la boa para consumo. Não que dizer que seja água potável, estado da água alcançado apenas após passar por tratamentos de laboratório e etc
        
        Água residuária: conhecida como esgoto, água que após passar pelo uso humano teve suas características alteradas
        
        Superficial ou Subterrânea
        
        Salobra, salgada ou doce
        
        De costa ou interior (que se localiza dentro do estado)
        
        Parâmetro de caracterização de área de estudo
        
        Qual orientação do estudo, importante saber tudo sobre seus aspectos
        
        Microbiológico
        
        biológicos
        
        Físico-Químico
        
        Informações a respeito da área de coleta
        
        Histórico de estudos
        
        Visita à área de coleta usando GPS
        
        Conhecimento das zonas de acesso
    - - Em sistemas de distribuição para consumo humano
        
        fazer a coleta em dois pontos preferencialmente, um próximo a ETA e outro no ponto mais distante da ETA. Isso indica a variação de qualidade na tubulação, como bactérias heterotróficas, que representa presença bacteriológica nos tubos
        
        •Verificar se o ponto de coleta recebe água diretamente do sistema de distribuição e não de caixas, reservatórios ou cisternas;
        •A torneira não deverá ter aeradores ou filtros, nem apresentar vazamentos de água;
        •Inicialmente abrir a torneira e deixar escoar a água por 2 a 3 minutos, ou o tempo suficiente para eliminar impurezas e água acumulada na canalização;
        •Caso seja necessário, utilizar uma solução de hipoclorito para eliminar qualquer tipo de contaminação externa;
        •Remover completamente o hipoclorito antes da coleta;
        •Abrir a torneira a meia secção (fluxo pequeno e sem respingos) por 2 minutos;
        •Remover a tampa do frasco conjuntamente com o papel protetor, com todos os cuidados de assepsia, evitando contaminação da amostra pelos dedos, luvas ou outro material;
        •Segurar o frasco verticalmente, próximo à base e efetuar o enchimento, deixando um espaço vazio de aproximadamente 2,5 a 5,0 centímetros do topo, possibilitando a homogeneização;
        •Fechar o frasco imediatamente após a coleta, fixando bem o papel protetor ao redor do gargalo e trazer ao laboratório sob refrigeração:
      - Poços Freáticos
        
        •Em poços equipados com bombas manuais ou mecânicas, bombear a água durante aproximadamente 5 minutos;
        •Realizar desinfecção da saída da bomba com hipoclorito;
        •Deixar a água escorrer novamente antes da coleta de amostra;
        •Remover a tampa do frasco conjuntamente com o papel protetor, com todos os cuidados de assepsia, evitando contaminação da amostra pelos dedos, luvas ou outro material;
        • Segurar o frasco verticalmente, próximo à base e efetuar o enchimento, deixando um espaço vazio de aproximadamente 2,5 a 5,0 centímetros do topo, possibilitando a homogeneização;
        • Fechar o frasco imediatamente após a coleta, fixando bem o papel protetor ao redor do gargalo e trazer ao laboratório sob refrigeração;
        • Em poços sem bomba, a amostragem deixa de ser feita diretamente no poço, utilizando um recipiente esterilizado (passar álcool em baldes);
        • Não retirar amostras da camada superficial da água, evitando a contaminação com espuma ou com outro material das paredes do poço.
      - Em rio, córregos e etc...
        
        Fazer a coleta em um ponto centralizado da água superficial, onde temos o ponto de mistura das substâncias lançadas no ponto de coleta e estratificação da temperatura
        
        Procurar evitar a coleta de amostras em áreas estagnadas ou em locais próximos às margens;
        
        Com todos os cuidados de assepsia, remover a tampa do frasco juntamente com o papel protetor;
        
        Com uma das mãos, segurar o frasco pela base, mergulhar rapidamente o frasco com a boca para baixo, de 20 centímetros abaixo da superfície da água, para evitar a introdução de contaminantes superficiais ;
        
        Direcionar o frasco de modo que a boca fique em sentido contrário à correnteza;
        
        Se o corpo de água for estático, deverá ser criada uma corrente superficial, através da movimentação do frasco na direção horizontal (sempre para frente);
        
        Inclinar o frasco lentamente para cima, a fim de permitir a saída de ar e subsequente enchimento do mesmo;
        
        Retirar o frasco do corpo d'água, desprezar uma pequena porção da amostra, deixando um espaço vazio suficiente que permita a homogeneização da amostra para análise;
        
        Fechar o frasco imediatamente, fixando o papel protetor ao redor do gargalo e trazer ao laboratório sob refrigeração. Para as análises de água superficial deve-se observar o sentido da correnteza e a profundidade mínima.
- - - - O modo mais comum de indicar presença bacteriológica patogênica na água é por micro-organismos indicadores.
        
        Esse micro-organismo é considerado indicador por apresentar algumas características:
        
        Aparecem em grande quantidade nas fezes de humanas e de animais de sangue quente
        
        Indica potencial presença de resíduos orgânicos na água
        
        Identificação e separação simples e rápida
        
        Viver em água da mesma forma que o patogênico
        
        Não reproduzirem-se
        
        Serem removidos e inativados na mesma proporção de patogênicos
        
        O principal grupo de micro-organismos indicadores são os Coliformes
        
        Muitos autores selecionam os micro-organismos indicadores, os mais comuns são:
        
        Coliformes Fecais
        
        Conhecidos também como termotolerantes. Produzem gás em temperaturas de 44,5 C +- 0,2 C em 24 horas
        
        Uma das bactérias mais comuns na identificação. Aconselha-se apenas a identificação desta como representante do grupo de coliformes termotolerantes. Ela tem origem exclusiva do trato intestinal dos humanos e animais de sangue quente
        
        Bactérias Heterotróficas
        
        Indicam poluição microbiológica, geralmente nas tubulações do sistema de distribuição. São bactérias que não possuem ação patogênica e indica infestação geralizada.
        
        Coliformes Totais
        
        O grupo coliforme é constituído de bacilos gram-negativos, anaeróbicos ou aeróbicos facultativos, fermentam a lactose a
        35 C +- 0,5 C, formando gás, ácido e aldeído em até 48 horas
        
        Vírus e protozoários são indicadores extra
        
        OBS: Não existe indicador ideal, o mais adequado é aquele com maior correlação com os riscos
- - - - Usa-se três etapas:
        
        Teste confirmativo para Coliformes Totais
        
        Deve-se agitar o tubo evitando a película superficial. Usando uma alça de platina flambada fazer a inoculação em uma solução de Bile Verde Brilhante (BVB). Levar até a Estufa de Cultua por 24 ou 48 horas em temperatura de 35 C
        
        Teste confirmativo para Coliformes Termotolerantes
        
        Aquecer a solução EC em banho maria por 30 min. Após isso, inocular com a alça de platina flambada os tubos com a solução EC (que também deve se evitar a película). Levar ao banho maria a 44,5 C
        
        Teste presuntivo:
        
        Distribui-se nos tubos de ensaio (que por sua vez estão com tubos de Duran dentro) 10 ml de caldo lactosado (duplo ou simples, sendo uma solução de 26 g para 1l de água pro duplo e 13 g para 1 l para o simples). Levar à estufa de cultura a 35 C até 48 horas