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Aspects des chromosomes (Empaquetage chromosomes (méthode (séparation…
Aspects des chromosomes
Centromères
kinétochore=microtubule organizing center
séquence CEN->stabilité des plasmides pr levures
attacher chr au fuseau de division
120kb
résistant aux nucléases
CDE I: 9pb conservé
CBF1 nécessaire
CDII riche en A/T
complexe prot 240kDa
CDE III 11pb conservé
complexe protéique nécessaire
homme: séq alpha satellites=fonc° centromériq?
C banding stains centromers and heterochromatine
Chromatine
Interphasique
1.2*10^4 compacté, 0.84um
mitotique
5-10x + condensé qu'en interphase
fibre 30nm
attachement aux protéines spécifiques matricielle? hors histones
méthodes
colorat° Feulgen: colorer l'ADN
colorat° Giemsa: colore régions riche en A/T->colore hétérochromatine
Empaquetage chromosomes
flexible
ratio= longueur si étiré/longueur du chromosome
pour la même quantité d'ADN
protéines d'empaquetage/d'interaction
Hu et H1 bactérie peu de fonctions
Hu rôle ds la condensation du nucléoïde
méthode
séparation d'ADN: centrifugation sur gradient sucrose
analyse superhélicité par BET
BET réagit sur ADN circulaire fermé
génère tour superhélicoïdal positif
Structure chromosome
bactérien
boucle: 40kb d'ADN soit 13um
grand nbre boucles->domaine
100 domaines/génôme-> ≠ degrés de surenroulement ds ≠ régions
eucaryote
matrice nucléaire
métaphase:
boucle 10-30um = 30-90kb
boucles accrochés aux protéines spécifiques
distribution chromatine interphasique
Matrix Attachment Region (MAR)
70% A/T
présence site régulation transcription
présence site reconnaissance Topoisompérase II
absence conservation séq MAR
Télomères
Séquences courts répétés en tandem
Cn(A/T)m
n >1 et m 1> >4
augmente 7-10pb/1-2 motif par division
télomérase
synthèse télomères
brin ADN riche en G/T=amorce
ARN=matrice
synthèse GGGTTGGG
critères
présente extrêmités chromosomes
conférer stabilité aux molécules linéaires