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MATERIAL E MÉTODOS (Foram feitos Teste de susceptibilidade aos…
MATERIAL E MÉTODOS
Foram feitos Teste de susceptibilidade aos antifúngicos: microdiluição em caldo para determinação da susceptibilidade aos antifúngicos
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Nistatina (Sigma N 3503, USA)
Concentrações variando de 0,125 a 64 ug/ml
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Anfotericina B (Fungizon, Bristol- Myers Squibb Brasil)
Concentrações variando de 0,03 a 16 ug/ml
Ao meio de cultura RPMI-1640, foi adicionado tampão(MOPS) e glicose e ajustado o pH para 7,0 com acido clorídrico
Aliquotas de 100 ul de dez concentrações de cada antifúngico foram dispensadas sequencialmente nas colunas numeradas 1 a 10 de cada placa de microtitulação de 96 poços
Concentração do inoculo foi ajustada em 90% de transmitância em 530 nm espectrofotômetro de modo que 100ul adicionado aos antinfungicos continha entre 0,5 e 2,5 x 10 UFC/ml
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Seleção dos voluntários e coleta do lavado bucal
- Pacientes HIV positivos
- Doentes de AIDS
- Maiores de 18 anos
Foram obtidas amostra dos pacientes através de bochecho (30 segundos) com 10 ml de solução fisiológica
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As alíquotas de 10 ul foram cultivadas em placas de Petri com meio seletivo diferencial (CHRO Mágar Candida) e incubadas a 25 °C/ até 5 dias.
As colonias individuais foram identificadas ao nível de gênero e especie baseado na produção de tudo germinativo
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Analise estatística
Foi utilizado o Teste Exato de Fisher para verificar se existe diferença significativa ao nível de 5% entre a susceptibilidade das leveduras isoladas
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