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HPLC (Aufbau (Säule (Trennleistung abhängig von (Teilchengröße möglichst…
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Aufbau
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Probenaufgabe
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Injektionsventil = exakt definiertes Volumen aber veränderbar, kein Unterbrechen, für hohe Drücke geeignet, chemisch inert, automatisierbar
Säule
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Arten
Universalsäulen = C18-Phasen, C8-Phasen
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Detektoren
UV/VIS Detektor
Empfindlich für Analyten mit Doppel- oder Dreifach-Bindungen, Carbonylverbindungen, org. Säuren, aromatische Verbindungen
Verbindungen, die in diesem Bereich nicht absorbieren, können durch Derivatisierung so umgewandelt werden, dass sie detektierbar werden
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Diodenarray-Detektor
Zeichnen Chromatogramm in Abhängigkeit von Zeit, Absorption, Wellenlänge auf.
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Floureszenz Detektor
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Lichtquelle = Xenon-, Deuterium- oder Quecksilber-Lampe
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Das in alle Richtungen emittierte Licht wird senkrecht zur Einstrahlungsrichtung gemessen, um zu verhindern, dass das Anregungslicht auf die Photomesszelle (Photomultiplier) fällt.
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Brechungsindex Detektor
Ein Lichtstrahl (L1) wird durch die Referenzzelle und anschließend durch die Messzelle geleitet, dann an einem Spiegel reflektiert und dringt erneut durch beide Zellen.
Mit einer verstellbaren Glasplatte wird der Lichtsstrahl L2 so eingestellt, dass beim Durchgang des reinen Eluenten durch die Messzelle die max. Intensität der Photozelle erreicht wird (Nullabgleich).
Strömt ein Analyt durch die Messzelle, ändert sich der Brechungsindex im Vergleich zum Eluenten im Referenzmaterial.
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