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Diagnóstico de laboratorio en infecciones virales (ELEMENTOS CLAVES…
Diagnóstico de laboratorio en infecciones virales
¿DE QUÉ DEPENDE?
Características del hospedero
Enfermedades crónicas
Enfermedades malignas y tratamiento
Embarazo 🤰
Inmunosupresión
Edad (👦👵)
Tiempo de evolución de la infección
Características del virus
Carga viral (Q)
Variedad de Serotipos y Genotipos
Disponibilidad de ensayos
Tipo de enfermedad (prevalente o baja frecuencia)
Genoma y Envoltura
CARACTERÍSTICAS
Es la identificación de un agente viral como causa de una enfermedad infecciosa
Se realiza para hacer un dg. entregando el tratamiento o discontinuar antibacteriano
Se define un pronóstico
Evaluación de pacientes de riesgo
Prevención de transmisión IAAS
ELEMENTOS CLAVES
Elección de la mejor muestra
Lugar anatómico de la toma de muestra
Obtener
muestras en fase aguda
de la infección
Transporte de la muestra
Conocimiento de la clínica y patogenia de la enfermedad
Interpretación de los resultados
Conocimiento del rendimiento de las técnicas y sus limitaciones
IDENTIFICACIÓN
Hospedero
La respuesta inmune
IgM
IgG
Virus
Identificación de secuencias génicas de proteínas, enzimas propias de cada virus
PCR y RT-PCR ADN-ARN
Identificación de Ag.
Proteínas de superficie, de matriz, envoltura
OPCIONES DE DIAGNÓSTICO
Detección de Ag (IF, ELISA, IH)
La
IF
dg. múlriples agentes a partir de una muestra y permite estudiar Ag y Ac con un promedio de 4 hrs. de espera.
Usado frecuentemente, junto con el test pack, en virus respiratorios
Se requiere de un microscopio de epifluorescencia y un operador entrenado en esta técnica
Serología
Define si la infección es aguda (IgM) o pasada (IgG)
Técnicas usadas: IF y ELISA
Secuenciación / Genotipificación
Se estudia el orden de los pares de bases en un segmento de interés
Se buscan mutaciones que representen un cambio importante en la síntesis proteica
Cultivo viral tradicional y acelerado
Detección de ácidos nucleicos
(reacción de polimerasa en cadena-PCR)
Las secuencias del genoma viral son propias de cada familia y tipo de virus
Harta sensibilidad. Técnica usada: PCR. Requiere personal entrenado.
PRINCIPALES USOS BM
Infecciones del SNC
Virus Respiratorios
Monitoreo de evolución de infección (VIH) y respuesta a tratamiento (Hepatitis B y C, CMV, Epstein Barr)
Medicina del transplante e Inmunosuprimidos
ANTIVIRAL
Mecanismo de acción
Inhibición liberación intracelular del virus (denudamiento)
Inhibidores de enzimas virales específicas
proteasa, integrasa (VIH), neuroaminidasa (influenza)
Bloqueo de adsorción
Inhibidores síntesis de ácidos nucleicos
Antivirales disponibles
Ganciclovir
Es derivado del aciclovir
Infecciones por CMV y CMV en SIDA, transplantados, prematuros
Alta toxicidad vía parenteral (hematológica y renal). Uso oral es más reciente
Aciclovir
Análogo nucleósido Guanosina
Infecciones por Herpes Simplex 1 y 2
Tópico, Oral y Parental
Bloqueo de la replicación: Requiere de activación con fosforilación de kinasas viral y celulares. El aciclovir trifosfato es incorporado al DNA por la polimerasa viral.
Inhibidores neuroaminidasa (NA)
La NA permite liberación de virus infecciosos y propagación viral a nuevas células
Actúa sobre la Influenza A y B
Acortan síntomas en 1,5 días
Disminuye complicaciones (bronquitis, sinusitis)
Uso preventivo aprovado
Oseltamivir (Tamiflú ®) y zanamivir (Relenza ®)
Antivirales VIH
Antiviral ideal
Seguro, sin efectos colaterales
Resistencia al antiviral manejable
Barato y fácil de producir
Bloqueo completo de la replicación
Fácil de administrar
Conocer el mecanismo de acción
VACUNAS VIRALES
Clasificación
Vivas atenuadas
Rspta. inmune sólida y duradera
Eliminación de la circulación del virus
Posibilidad de revertir a cepa virulenta
Puede haber interferencia con anticuerpos circulantes
Riesgo de contaminación medios celulares (otros virus, proteínas, etc.)
Trivírica (SRP) (1 año, 6 años)
Polio oral (2, 4, 6, 18 meses)
Varicela, Rotavirus, Fiebre amarilla (≥ 1 año, 2-3 dosis primeros 6 meses)
Inactivadas
Componentes purificados (fraccionados)
Influenza
Hepatitis B
HPV
Enteras
Rabia
Hepatitis A
Polio parental (Salk)
Influenza
No pueden replicarse (sin riesgo inmunodeprimidos)
Generalmente no tan efectivas como las vacunas vivas
Mínima interferencia con anticuerpos circulantes
Rspta. inmune principalmente humoral
Anticuerpos caen con el tiempo
Generalmente requieren 3-5 dosis
Requieren de adyuvantes
Ag principal puede no estar bien definido
Adyuvantes
Sustancias que ayudan a estimular una rspta. inmune más robusta requiriendo menos antígeno
Mecanismo de acción
Presentación de Ag
Localización Ag al sitio de inoculación
Estimulación directa rspta. inmune
Ejemplos: Sales de aluminio, Emulsiones, Microesferas, Liposomas
Vacuna ideal
Inducción de respuesta inmune protectora
Rspta. inmune innata, celular y humoral
Aspectos prácticos
Costo
Estabilidad
Facilidad de administración
Aceptación por el público
Seguridad
Efectos colaterales mínimos
No debe causar enfermedad
ALGUNOS CONCEPTOS
Inmunogenicidad
Rspta. inmune humoral y celular
Estabilidad
Mantención componentes activos en condiciones transporte y almacenaje
Seguridad
Reactogenicidad adaptable sin efectos adversos serios
Eficacia
Capacidad de proteger contra la enfermedad
Reactogenicidad
Efectos colaterales (locales y sistémicos)
Eficiencia
Relación costo-beneficio
Efectividad
Eficacia en una población en condiciones reales
MEMORIA INMUNE
Presencia de Linfocitos T y B específicos que permanecen luego de una infección y mantienen la capacidad de proliferar y responder ante una infección subsecuente
Vacuna idea
l estimula
Célula B: anticuerpos séricos y en mucosa
Células T: inmunidad celular