Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Lääkeaineen pitoisuuden määrittäminen näytteessä HPLC-UV -menetelmällä…
Lääkeaineen pitoisuuden määrittäminen näytteessä HPLC-UV -menetelmällä
HPLC-UV -menetelmä
mahdollistaa aineiden erottelemisen toisistaan
lääkeaine saadaan eroteltua apuaineista ja hajoamistuotteista
pelkkä UV-Vis -spektrofotometria
määritystä häiritsevät
lääkevalmisteen apuaineet
lääkeaineen mahdolliset hajoamistuotteet
soveltuu kaikenlaisten näytteiden analysointiin
edellytyksenä vain näytteen liukeneminen johonkin liuottimeen
käytetään
lääkevalmisteiden analysointi
lääkeaineiden
stabiilisuustutkimukset
metaboliittien analysointi biologisista näytteistä
jakautumiskertoimen/pKa-arvojen määrittäminen
Euroopan farmakopean lääkeainemonografiat
puhtauskokeet
aineiden tunnistaminen
pitoisuusmääritykset
toimintaperiaate
yhdisteiden erottuminen perustuu niiden hydrofobisuuseroihin
erilainen tasapaino liikkuvan ja stationäärifaasin välillä
tarttuu heikosti stationäärifaasiin
suuremman osan ajasta liikkuvassa faasissa
nopea kulkeutuminen kolonnin läpi
työssä käytettiin käänteiskromatografiaa
polaariset yhditeet eluoituu ensin, poolittomat viimeiseksi
stationäärifaasi pooliton, liikkuva faasi poolinen
yhdisteen havaitseminen kromatogrammissa
näytemolekyyli tuottaa signaalin (piikin)
aineelle ominainen retentioaika
intensiteetti suoraan verrannollinen tutkittavan aineen pitoisuuteen näytteessä
näytteen sisältämän pitoisuuden kvantitointi
tuntematon näyte
konsentraation määritys perustuu standardisuoran käyttöön
resoluutio
laskeminen varmistaa menetelmän toimivuuden
kullekin yhdisteelle hyväksyttävä arvo löytyy farmakopeasta
erottuvatko näytteet toisistaan pohjaviivaan asti
HPLC-laitteisto koostuu
pumput
eluenttiliuoksen pumppaaminen laitteiston läpi
injektori
näytteen syöttäminen laitteistoon
kolonni
näytekomponenttien erottuminen
detektori
työssä detektorina UV-spektrofotometri
mittaa näytevyöhykkeiden aiheuttamaa absorbanssia
havaitaan kolonnista eluoituvat näytevyöhykkeet
tiedonkeruulaitteisto
detektorin data kuvaajaksi (kromatogrammiksi)
ASA
standardinäyte
5 eri vahvuista standardiliuosta eluenttiliuokseen
HPLC-UV-analyysi
standardisuoran laatiminen
pinta-ala konsentraation funktiona
suoran yhtälö
virheet valmistuksessa/laimentamisessa
väärät pitoisuudet
standardisuorasta ei tule oikeanlaista välttämättä
virhe näytteiden pitoisuuksia laskettaessa
näytteiden suodattamisessa virheitä
muutosta pitoisuuksiin
ylimääräisiä partikkeleita
haittaavat mittauslaitteiston toimintaa
vaikutusta retentioaikoihin
unohtuu
lisää epäpuhtauksia näytteeseen
tavallisesta poikkeavia
voi olla peräisin myös likaisista astioista
eluenttiliuos
pieni muutos pH:ssa
merkittävä vaikutus aineen retentioon
tunnistaminen ei onnistu
ilma poistettava
ilmakupla
liikkuva faasi ei liiku tasaisesti
yhditeiden retentioajat muuttuvat
ASA -näytteiden analysointi
samat olosuhteet
sama retentioaika kuin standardinäytteissä
näytteessä ASA:aa
ASA-piikin pinta-alan määritys
injektoidun näytteen ASA-pitoisuus standardisuoran yhtälön avulla
laimennokset huomioitava
näytteiden ASA-pitoisuudet
ongelmat näytteiden kanssa
valmistuksessa, laimennoksia tehdessä
pitoisuudet vääränlaisia
virheet laskuissa
virhe lopputulokseen
suodattaminen
muutos pitoisuuksiin
ylimääräisiä partikkeleita
haittaavat pumpun toimintaa
tukkivat laitteiston kapillaareja tai injektioneulan
vaikutusta retentioon
aineen tunnistaminen ei välttämättä enää mahdollista