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SEXAGEM DE ESPERMATOZÓIDES (Sêmen sexado (Fecundação in vitro,…
SEXAGEM DE ESPERMATOZÓIDES
Introdução
Gônada indiferenciada: Se organiza como testículo ou ovário
Diferenciação gonadal: Inicia funcionamento endócrino / Fenótipo
Métodos de sexagem: Baseado em DNA
Cromossomo X: Maior que cromossomo Y (Maior quantidade cromatina heteróloga)
Sexo
Fêmea
Gado de leite / Gado de leite de elite
Macho
Gado de corte / Cruzamento industrial
Sêmen sexado
Fecundação in vitro
Comercialização: Criopresevação
Inseminação artificial
Prenhez maior: Novilhas
Durabilidade: Descongelado 3-4 horas / Normal 12 horas
SELEÇÃO DO SEXO
CITOMETRIA DE FLUXO
Coloração vital do DNA (Corante de fluorescência HOECHST 33342 / 37°C / 1 hora / Sêmen diluído em meio de cultura)
Espermatozóide + Solução de tampão fosfato salino (PBS): Espermatozoides presos um a um no centro de um jato estreito / Emissão da fluorescência do DNA
Citômetro de fluxo / Circula por pressão
Computador: Carga negativa: X / Carga positiva: Y
Vantagem: Acuidade de separação: 90%
Desvantagem: Dispendiosa / Corante afeta viabilidade dos espermatozoides
Eficiência: 85-90 %
CENTRIFUGAÇÃO EM GRADIENTE DE INTENSIDADE
Vantagem: Sexagem a partir de sêmen congelado
Desvantagem: Difícil recuperação dos espermatozoides masculinos
Bovinos: Gradientes descontínuos de Percoll
Eficiência: 70%
Centrifugação / Diferença na densidade entre espermatozóides