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COLETA E TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES (FATORES QUE CONTIBUEM PARA O SUCESSO T…
COLETA E TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES
DEFINIÇÃO
é a tecnica que visa a remoção do embrião do utero de uma femea doadora previamente inseminada para que seja transferida para uma fêmea receptora
DOADORA
Tem que ter alto valor zootecnico
Tera seus oocitos fertilizados
O embrião será retirado antes que ocorra a implantação embrionaria
SELEÇÃO
Avaliar o histórico reprodutivo
Fertilidade
Caracteristicas hereditarias desejáveis
MANEJO
Monitorar o comportamento reprodutivo
Superovulação
Comum em bovinos, éguas não respondem bem a este tratamento
Aplicam-se hormonios em espécies monovulatórias que faz com que aumente o numero de foliculos
IA no momento adequado
Recptora
Tem ambiente uterino aproriado, boa habilidade materna e levará a gestação até o fim e criará até o desmame
SELEÇÃO
Histórico reprodutivo
Boa condição uterina
Boa conformação vulvar
Tamanho apropriado para evitar problemas durante o parto
Habilidade materna
Docilidade
MANEJO
Monitorar comportamento reprodutivo
Sincronizar o cio da recptora com a dodora
Janela de sincronização
entre +1 (ovulação um dia antes da receptora)
a -3 (ovulação três dias após a doadora)
Com objetivo de eliminar a sincronização, tem sido utilizado fêmeas ovariectomizadas tratadas com progestagenos como receptoras *principalmente equinos
T.E. EM BOVINOS
DOADORA
Superovulação
IA
Retirada do embrião
Sincronização de cio
Acasalamento normal ou retorno ao estro após dois ou três meses para outra transferência
RECEPTORA
Sincronização do cio
Estro
Transferência de embrião
Prenhez
Parto
DESCRIÇÃO SIMPLIFICADA
Fazer a superovulação (tratamento hormonal)
IA prévia da fêmea
Recuperação embrionária entre o dia 6 e 8
PROCEDIMENTO CIRURGICO DA RETIRADA DO EMBRIÃO
Introduzir a sonda de Foley guiada pelo mandril
Passagem pela cérvix (fazer anestesia epidural para ter o relaxamento e abertura da mesma)
Inflar o balonete (para que o conteúdo não volte e você não tenha perda do embrião e corrimento vaginal)
Lavar o útero
lavagem de 2 litros (divido entre infusões de 40 a 50ml em cada lavagem)
Passar para outro corno úterino e realizar o mesmo procedimento
Utilizar solução salina tampão-fosfato (PBS) é a mais utilizada pois é a que melhor se assemelha com o PH , alguns lugares tambem utilizam Ringer
Recuperar líquido infundido (a recuperação é feita pela própria sonda ou seja o liquido vai e volta por ela)
Ao finalizar aplicar PGF para evitar gestação indesejada fazendo a lise do corpo lúteo
Avaliar o embrião
Acompanhar sempre com US
MANIPULAÇÃO DE EMBRIÕES
Equipamentos utilizados
Meio de lavagem
Placa de petri
Microscópio estereoscópio (lupa)
Rastreia o embrião com aumento de 50 a 80x
Avalia a morfologia em um score de 1 a 4
Pipetas de laboratório
AVALIAMOS
Tamanho, forma, cor homogeneidade do citoplasma, forma da integridade da membrana prelúcida, tamanho e presença de células no espaço perivitelíneo e a presença de vesículas
CLASSIFICAÇÃO DE EMBRIÕES (QUALIDADE)
Grau 1
Excelente
Embriões uniformemente granulados e perfeitamente simétrico com contorno bem definido
Ausência de extrusão de blastômero
Embrião no estágio esperado de desenvolvimento esperado para a sua idade
Cor e textura uniforme
Grau 1
Bom
Embrião uniformemente granulado e com contorno bem definido
Alguma extrusão de blastômero
Morfologia um tanto assimétrica
Distinção de forma e cor
Poucas vesiculas
Grau 3
Pobres (regular)
Embrião intacto com contorno pouco definido
Células extrusas
Vesiculação ou blastômeros degenerados
Grau 4
Mortos
Embrião com granulação irregular ou contorno pouco especifico
Alguma extrusão de blastomero ou degeneração
Forma anormal
Degenerados
Estagio de desenvolvimento dificil de determinar
Desorganização celular
TECNICAS
CIRURGICA
Tem melhor resultado de prenhez
Desvantagens: necessidades de melhores instalações e mão de obra
Por via cervical
Muito menos invasiva e rápida
Deposita o embrião no corpo do útero com um inovulador ou uma pipeta de inseminação (somente no dia 6, embrião menos) que atravessa a cérvix
No inovulador o embrião é envasado em palheta plástica de 0,25 ml em porções alternadas de solução de manutenção do ar (minimiza os movimentos do embrião na palheta e assegura a perfeita expulsão do embrião para dentro do útero. Sempre com anestesia epidural e fêmeas em fase progesterônica
NÃO CIRURGICA
LAPAROSTOMIA
T.E. em equinos
Maioria dos embriões produzidos por T.E. são provenientes de ovulação simples, ou seja não utilizão superovulação
Embrião colhido do sétimo a oitavo dia pós ovulação
Vantagens
Obter potros de éguas problemáticas e mais velhas
maior produção de éguas geneticamente superiores
Obter produtos de éguas que se encontram em
performance, sem a necessidade de parar as
atividades em razão de gestação e/ou lactação
Obter produtos de potras com dois anos
de idade sem alterar seu desenvolvimento
TECNICA
Procedimento não cirurgico transvaginal (acesso via cervical)
Utilização de catéter de três vias (diferente do bovino que são duas)
Passagem pela cérvix
Inflar balonete
Lavagem
3 a 4 lavagens com infusão de 1 a 2 litros de cada lavagem de 3 a 6 no total
Solução salina + fosfato puro modificado (DPBS) previamente aquecida(30–35ºC) + 1% de soro fetal bovino + penicilina (100 UI/ml) + estreptomicina (100 µg/ml) ou • Ringer Lactato
Recuperação do líquido infundido
enos invasiva e mais rápida, com alto percentual de prenhez Consiste em depositar o embrião no corpo do útero com o uso de um inovulador ou pipeta de inseminação (D6) que atravessa a cérvix
Tecnica cirurgica (via flanco)
MANIPULAÇÃO DO EMBRIÃO EQUINO
rastreamento dos embriões com auxílio de microscópio
estereoscópico (lupa)
aumento 10x
avaliação da qualidade leva em consideração
• Morfologia score de 1 a 4, avaliação do formato, simetria, coloração Aumento de 40X
FATORES QUE CONTIBUEM PARA O SUCESSO T.E.
Método de inovulação
Sincronização
Qualidade dos embriões
Acompanhamento da gestação
VANTAGENS
Obtenção de mais de um produto por ano
Obtenção de produtos de fêmeas que por algum motivo não possam levar
uma gestação a termo
Produtos de fêmeas subférteis por problemas adquiridos
Multiplicação de uma determinada genética com mais rapidez
Obtenção de produtos de fêmeas pré púberes
DESVANTAGENS
Adaptações de manejo, estrutura, equipamentos e profissionais capacitados;
Investimento maior que a IA
Necessidade da sincronização das fêmeas
Necessidade de grande número de fêmeas receptoras