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10.GENÉTICA FORENSE (1.2.2 Métodos de Detecção (Componentes de um…

- - - - norte-americano JAMES WATSON - britânico FRANCIS CRICK: 7 de março de 1953. ganharam o prêmio Nobel de Fisiologia/Medicina em 1962, juntamente com MAURICE WILKINS.
    - - o DNA é um longo polímero de unidade simples (monômeros) de nucleotídeos, cuja cadeia principal é formada por moléculas de açúcares e fosfato intercalados unidos por ligações fosfodiéster.
      - Ligada à molécula de açúcar está uma de quatro bases nitrogenadas - A sequência de bases ao longo da molécula de DNA constitui a informação genética.
        
        A leitura destas sequências é feita através de código genético, que especifica a sequência linear dos aminoácidos das proteínas -
        
        Tradução:
        
        tradução- é feita por um RNA mensageiro que copia parte da cadeia de DNA por um processo chamado TRANSCRIÇÃO e posteriormente a informação contida neste é "traduzida" em proteínas pela tradução.
        
        Embora a maioria do RNA produzido seja usado na síntese de proteínas, algum RNA tem função estrutural, como por exemplo o RNA ribossômico, que faz parte da constituição dos ribossomos.
        
        Dentro da célular, o DNA pode ser observado numa estrutura chamada cromossoma durante a metáfase. O conjunto de cromossomas se uma célula forma o CARIÓTIPO. Antes da divisão celular os cromossomas são duplicados através de um processo chamado REPLICAÇÃO.
        
        Eucariontes como animais/plantas/fungos/protozoários têm seu DNA no NÚCLEO. Já procariontes como bactérias têm no citoplasma.
        
        Dentro dos cromossomas, proteínas da cromatina como as histonas compactam e organizam o DNA. Estas estruturas compactas guiam as interações entre o DNA e outras proteínas, ajudando a controlar que partes do DNA são transcritas.
- - - - Todo o restante trata-se de sequências repetitivas que tem função estrutural-
        
        É a variabilidade deste restante-REGIÕES HIPERVARIÁVEIS (POLIMÓRFICAS), de função estrutural, que se utiliza nos EXAMES DE DNA.
- - - - são compostos por diferentes nucleotídios em uma determinada localização do genoma-
        
        Estas variações em sequência podem ser manisfestadas como regiões de alelos alternativos ou substituições, adições ou deleções de BASES, mas a maioria dos polimorfismos de sequência é mera mutação pontual.
    - - são sequência de nucleotídeos que se repetem, sendo denominados VNTRs(número variável de repetições consecutivas)-
        
        Aquelas com repetições da sequência básica de aproximadamente 2 a 8 bp são denominadas de regiões microssatélites ou STRs-
        
        Os minissatélites são formados por sequências de vários nucleotídeos, por exemprlo, (ATGCGGCTACTGAGCC)n, repetidas números diferentes em cada indíviduo, dando-lhe uma característica única.
        
        Um lócus de minissatélite pode ter muitos alelos em função do número de vezes(n) em que esta estrutura é repetida ao longo do DNA, deixando a população polimórfica em relação ao lócus.
        
        Os loci de microssatélites (STR) ou repetições curtas consecutivas se assemelham aos minissatélites, porém com estrutura repetida menor, como: (GATA)n. O número de repetições básicas nos minissatélites e microsatélites pode variar em diferentes indivíduos criando um polimorfismo de comprimento.
- - - - Ela permite a amplificação seletiva, in vitro, de sequências específicas do DNA alvo que se deseja estudar-
        
        Os loci de microssatélites conhecidos por STR apresentam alelos ou fragmentos de DNA de 100 a 300 pares de bases.
  - - - Este aparelho automaticamente propiciará que, através da programação apropriada de repetidos CICLOS de variação de temperatura, se dê, no interior do microtubo a amplificação específica do DNA-
        
        Cada CICLO é composto de 3 passsos:
        
        Etapa de desnaturação:
        
        separação da fitas do DNA molde
        
        anelamento:
        
        pareamento ou ligação dos iniciadores-primes ao início da região específica)
        
        extensão:
        
        atuação da Taq-DNApolimerase que propiciará o pareamento dos nucleotídeos livres.
- - - - Se encontra no núcleo
    - - se encontra na organela citoplasmática.
      - O DNA mitocondrial (mtDNA) é uma molécula de DNA extra cromossomal haploide de herdabilidade UNIPARENTAL MATERNA.
      - Esta molécula é encontrada em grande número de cópias, podendo ser maior que 1000 cópias por unidade celular.
      - Se constitui em dupla cadeia circular, que devido à distribuição assimétrica de nucleotídeos, é dividida em cadeia pesada (H) e cadeia leve (L), apresenta aproximadamente 16.569 pb (pares de bases), sendo que somente 10% de sua totalidade é não codificante.
      - Região D-loop
        
        região onde se inicia o processo de duplicação do material genético, sendo portanto, mais suscetível a ocorrência de mutações.
        
        assim, o sequenciamento desta região é o alvo de análises forenses-
        
        tem grande sucesso em amostras degradadas (ossos, dentes, fios de cabelo etc) por ser o mtDNA menor, circular e ter várias cópias por célula.